[发明专利]生物材料及其用途

说明书

本发明涉及生腱蛋白-C和其在慢性炎症中的活性。还提供了生腱蛋白-C和其生物活性的调节剂以及进一步地生腱蛋白-C在上调或下调慢性炎症的试剂的鉴定中的用途。

炎症是组织对有害刺激例如病原体、组织损伤或刺激物的复杂生物反应。其是组织为了去除致害（injurious）刺激以及启动组织的愈合过程进行的保护性攻击。与炎症有关的异常包括一大组不相关的异常，该异常是多种人类疾病（炎性疾病）的基础。具有炎症表现的疾病的实例包括（但不限于）：哮喘、自身免疫性疾病、肾小球肾炎、过敏症（超敏反应）、炎性肠病、再灌注损伤、类风湿性关节炎和移植排斥。

特别地，慢性炎症是与上述疾病的多种相关的虚弱和严重的病情，并且其特征是，在感染或损伤部位的持久炎症，或者涉及免疫应答的改变，例如在自身免疫性疾病中。

类风湿性关节炎(RA)虽然不是唯一的，但却是慢性炎症性病情的典型实例。RA的特征在于，由促炎细胞因子和基质金属蛋白酶(MMP)的持久合成所介导的滑膜炎以及关节软骨和骨的破坏。抑制炎症细胞因子例如TNFα和IL-6的合成的生物化合物在长期治疗RA方面是成功的。然而，需要重复治疗使得该生物化合物成为昂贵的治疗方法，并且不能提供长期缓解。此外，对细胞因子功能进行完全的全身性抑制并非没有内在的问题，例如感染风险的增加。因此，尽管在护理中有进步，但是其仍未满足在长时间内有效的经济的慢性炎症的治疗的需要(Smolen(2006)和Williams(2007))。

支撑疾病的慢性的机制仍然不清楚并且促使炎症介质和破坏介质延长表达的因素（或多种因素）目前尚未知晓。

Toll样受体(TLR)在推动RA中炎症介质的生成中起关键作用，而TLR功能的阻滞在临床上可以是有显著的益处的(在Brentano(2005)和O’Neill(2002)中综述)。该受体家族形成免疫系统的完整部分。TLR通过识别病原相关分子模式(PAMPs)和损伤相关分子模式(DAMPs)来介导宿主防御感染和损伤(Matzinger(2002))。DAMP是根据组织损伤而产生的内源性促炎分子并且包括由损伤细胞或坏死细胞释放的细胞内分子、细胞外基质(ECM)分子的片段或对损伤上调的ECM分子(在Bianchi(2007)和Gordon(2002)中综述)。

在活化后，TLR促进先天免疫应答和后天免疫应答，包括：促炎细胞因子和MMPs的表达的刺激(Medzhitov(2002))。TLR在来自RA患者的滑膜组织中高水平表达(Radstake(2004)、Roelofs(2005)、Sacre(2007)和(Sacre,2008年提交的原稿)，并且其保护在TLR4中具有靶向的删除以及功能的丧失的突变的小鼠免受实验性关节炎(Choe(2003)和Lee(2005)。此外，TLR4的抑制剂可以减轻小鼠的破坏性关节炎(Abdollahi-Roodsaz(2007))，而在1期预试验中假定的TLR4抑制剂使23例患有中度至重度RA的患者中的15例的症状得到改善(Vanags(2006)。然而，在疾病发病机制中涉及哪种TLR配体（或多种配体）不清楚。

生腱蛋白-C是与组织损伤和伤口修复有关的ECM糖蛋白。生腱蛋白-C在胚胎发生过程中的活性组织再造时特异性表达，所述的表达在原肠胚形成和体节形成过程中最先观察到。在发育的随后阶段，表达限于乳腺和肺的分支形态发生的部位、正在发育的骨骼中、心血管系统中和上皮到间质转化部位的连接组织。一旦这些过程停止并且在胚胎发生结束之前，该表达下调(Jones(2000)。

生腱蛋白-C在健康成人组织中不是通常地表达的，但在成人中，在极性炎症过程中特异性地并且短暂地被上调，而在慢性炎症中被持久地表达(Chiquet-Ehrismann(2003)中综述)。免疫组织化学研究显示，生腱蛋白-C在正常的人类关节中有少量表达，但在RA滑膜中；在炎症和纤维化的区域中，特别地在滑膜衬里以下的区域中；在侵袭血管翳和血管周围，生腱蛋白-C的表达水平极大地增加(Cutolo(1992)、MacCachren(1992)和Salter(1993))。在RA患者的滑膜流体中(Chevalier(1994)和Hasegawa(2007))以及在RA软骨(Salter(1993)和Chevalier(1994))中，生腱蛋白-C的水平也显著性增加。