[发明专利]糖类结合模块及其用途

说明书

发明领域

本发明涉及糖类结合模块(CBM)的抗体模拟物，其特异结合至HIV糖蛋白的抗原表位。本发明也涉及抑制HIV活性的方法。

发明背景

已知人免疫缺陷病毒(HIV)引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，且因为HIV表现快速遗传漂移，出现了广泛分歧的株。因此，检测和治疗变异株已证明为有挑战的且是困难的。

也有紧急的需要开发有效的防病的疫苗和其他治疗策略以在该流行病持续不衰退时限制HIV传播。最成功的疫苗由可活性衰减的或灭活的病毒颗粒组成。然而，HIV相关的猿免疫缺陷病毒的活性衰减，引起没有所得病原性的保护性的反应还未被实现，产生使人类实验棘手的安全问题。同样，HIV有许多复杂的机制来有效地躲避被膜糖蛋白定向的抗体反应，包括通过构象和立体限制的聚糖屏蔽和掩饰脆弱的受体结合位点所得屏蔽井-保守的结构。因此，研究转向基于被膜蛋白的免疫原作为引出抗体的方法。糖蛋白120(gp120)为HIV-1被膜棘突的重要组分。Gp120的内部结构域与gp41相互作用，并且外部结构域十分可变且被重糖基化(Kwong，RD.等.Structure of an HIVgp120 envelope glycoprotein in complex with the CD4 receptor and a neutralizing human antibody.Nature 393，648-659(1998))。基于比较序列分析，gp120被分成五个保守段(C1至C5)和五个可变(V1至V5)区域(Willey，R.L.等.Identification of conserved and divergent domains within the envelope gene of the acquired immunodeficiency syndrome retrovirus.Proc Natl Acad Sci U S A 83，5038-5042(1986)和Modrow，S.等.Computer-assisted analysis of envelope protein sequences of seven human immunodeficiency virus isolates：prediction of antigenic epitopes in conserved and variable regions.J Virol 61，570-578(1987))。C1和C5区域提供gp120与gp41接触的主要区域(Helseth，E.，Olshevsky，U.，Furman，C.&Sodroski，J.Human immunodeficiency virus type 1 gp120envelope glycoprotein regions important for association with the gp41transmembrane glycoprotein.J Virol 65，2119-2123(1991))，其他保守区域(C2至C4)在gp120分子内形成疏水核(Moore，J.P.，Sattentau，QJ.，Wyatt，R.&Sodroski，J.Probing the structure of the human immunodeficiency virus surface glycoprotein gp 120 with a panel of monoclonal antibodies.J Virol 68，469-484(1994)and Moore，J.P.，Willey，R.L.，Lewis，GK.，Robinson，J.&Sodroski，J.Immunological evidence for interactions between the first，second，and fifth conserved domains of the gp120 surface glycoprotein of human immunodeficiency virus type 1.J Virol 68，6836-6847(1994))且可变区域，V1至V3，暴露在单肢gp120表面，并具有用于抗体识别和CD4的结合位点的主要表位(Chen，L.等.Structural basis of immune evasion at the site of CD4attachment on HIV-1 gp120.Science 326，1123-1127(2009)，Moore，J.P.&Sodroski，J.Antibody cross-competition analysis of the human immunodeficiency virus type 1 gp120 exterior envelope glycoprotein.J Virol 70，1863-1872(1996)，Pollard，S.R.，Rosa，M.D.，Rosa，JJ.&Wiley，D.C.Truneated variants of gp120 bind CD4 with high affinity and suggest a minimum CD4 binding region.EMBO J 11，585-591(1992)and Olshevsky，U.等.Identification of individual human immunodeficiency virus type 1 gp120 amino acids important for CD4 receptor binding.J Virol 64，5701-5707(1990))。