[发明专利]检测抗生素耐药细菌的方法和试剂盒

权利要求书

1.试剂盒，其包含用于在一个反应中鉴定多种引起细菌碳青霉烯耐药性的碳青霉烯酶基因的一组引物对，所述引物由选自SEQ ID NOS:15和16、SEQ ID NOS:1或49和2、SEQ IDNOS:7和8、SEQ ID NOS:9和10、SEQ ID NOS:13和14、SEQ ID NOS:19、20、21和22的核苷酸序列组成，用于确定VIM、GES、SIM-1和/或IMP基因中的一种或多种以及KPC和OXA-48的存在。

2.权利要求1的试剂盒，其中所述试剂盒还包含下述引物，所述引物由选自SEQ IDNOS:3和4、SEQ ID NOS:5和6、SEQ ID NOS:11和12、SEQ ID NOS:17和18的核苷酸序列组成，用于确定SME、GIM-1、SPM、和/或IMI/NMC-A基因中的一种或多种的存在。

3.权利要求1或2的试剂盒，其中所述试剂盒还包含下述引物，所述引物由选自SEQ IDNOS:23和24、SEQ ID NOS:25和26、SEQ ID NOS:27和28、SEQ ID NOS:29和30、SEQ ID NOS:31和32、SEQ ID NOS:33和34、SEQ ID NOS:35和36、和SEQ ID NOS:37和38的核苷酸序列组成，用于确定OXA-24、25、26、-40、-72、OXA-23、-27、OXA-50、OXA-51、64-71、75-78、83、84、86-89、-92、-94、-95、OXA-55、OXA-58、OXA-60和OXA-62基因中的一种或多种的存在。

4.权利要求1或2的试剂盒，其中所述试剂盒还包含下述引物，所述引物由选自SEQ IDNOS:25和26、SEQ ID NOS:43和44、SEQ ID NOS:45和46、SEQ ID NOS:31和32、SEQ ID NOS:33和34、SEQ ID NOS:35和36、SEQ ID NOS:37和38、SEQ ID NOS:39和40、SEQ ID NOS:41和42、SEQ ID NOS:47和48、和SEQ ID NOS:7和8的核苷酸序列组成，用于确定OXA-23群、OXA-24群、具有ISabaI启动子的OXA-51群、OXA-55、OXA-58、OXA-60、OXA-62、CMY-1、-10、-11、SFC-1、NDM-1和/或SIM-1基因中的一种或多种的存在。

5.用于在一个反应中鉴定多种碳青霉烯耐药基因的寡核苷酸引物对，其中所述寡核苷酸由核苷酸序列SEQ ID NOS:15和16，和SEQ ID NOS:1或49和2，以及选自SEQ ID NOS:9和10、SEQ ID NOS:13和14、SEQ ID NOS:19、20、21和22的至少一对核苷酸序列组成。

6.用于在一个反应中鉴定多种引起细菌碳青霉烯耐药的碳青霉烯酶基因的装置，其包含第一和第二个多重反应，其中在第一个多重反应中在单个反应内检测KPC和OXA-48，以及VIM、GES、SIM-1和/或IMP的基因中的一种或多种；所述检测通过使用引物进行，所述引物由引物对SEQ ID NOS:15和16和SEQ ID NOS:1或49和2，以及选自SEQ ID NOS:9和10、SEQ IDNOS:13和14、SEQ ID NOS:7和8、以及SEQ ID NOS:19、20、21和22的至少一对引物对组成。

7.权利要求6的装置，其中在所述多重反应中在单个反应内进一步检测选自SME、GIM-1、SPM和/或IMI/NMC-A的基因中的一种或多种或全部，所述检测通过使用引物进行，所述引物由选自SEQ ID NOS:3和4、SEQ ID NOS:5和6、SEQ ID NOS:11和12、和SEQ ID NOS:17和18的引物对组成。

8.权利要求6或7的装置，其中在第二个多重反应中在单个反应内检测选自OXA-23群、OXA-24群、具有ISabaI启动子的OXA-51群、NDM-1、OXA-58、CMY、SFC-1和/或SIM-1的基因中的一种或多种或全部，所述检测通过使用引物进行，所述引物由选自SEQ ID NOS:23和24、SEQ ID NOS:25和26、SEQ ID NOS:43和44、SEQ ID NOS:45和46、SEQ ID NOS:47和48、SEQID NOS:33和34、SEQ ID NOS:39和40、SEQ ID NOS:41和42和SEQ ID NOS:7和8的引物对组成。