[发明专利]荧光细胞标记

权利要求书

1.一种氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，所述化合物由如下组成

其中R₁是硝基且X选自由硫和NR组成的组，所述方法包括如下步骤：

a.硝基取代的2-(2-氯苯乙烯基)苯并噻唑的合成；

b.硝基的还原；和

c.所述硝基取代的2-(2-氯苯乙烯基)苯并噻唑的光诱导环化过程以产生生物荧光的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐。

2.如权利要求1所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中硝基的还原包括利用硼化镍作为催化剂的肼。

3.如权利要求1所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中硝基取代的2-(2-氯苯乙烯基)苯并噻唑的合成包括：

a.将等摩尔混合物溶解于摩尔过量的醋酐中并回流18h至24h，其中所述等摩尔混合物由2-氯取代的苯甲醛和2-甲基吲哚衍生物组成；

b.使所述等摩尔混合物在23℃-25℃之间的温度冷却，其中沉淀出固体；和

c.分离沉淀的固体并将所述固体进行重结晶过程。

4.如权利要求3所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中所述沉淀的固体通过过滤分离，用醋酐或冷的2∶1己烷/丙酮混合物洗涤。

5.如权利要求3所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中所述重结晶过程包括选自丙酮、己烷/丙酮1∶1混合物、环己烷或甲苯的有机非质子溶剂。

6.如权利要求1所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中硝基取代的2-(2-氯苯乙烯基)苯并噻唑的合成包括：

a.在23℃-25℃之间的温度和恒定搅拌下，将等摩尔溶液加入50％氢氧化钠溶液，其中所述等摩尔溶液由在大约10mL二甲基亚砜中的2-甲基苯并噻唑和2-氯-6-取代的苯甲醛组成；

b.搅拌所述等摩尔溶液额外的5-15min；

c.加入水并搅拌约5min直到固体沉淀；和

d.分离沉淀的固体并将所述固体进行重结晶过程。

7.如权利要求6所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中所述沉淀的固体通过真空过滤分离。

8.如权利要求6所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中所述重结晶过程包括甲苯或丙酮。

9.如权利要求6所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中加入所述等摩尔混合物的步骤包括在沸腾的醋酐中回流所述等摩尔溶液与小量的2-甲基吲哚衍生物，持续48h至168h之间的反应时间。

10.如权利要求1所述的氨基取代的氯化吲哚并[3，2-a]喹啉鎓盐化合物的合成方法，其中硝基取代的2-(2-氯苯乙烯基)苯并噻唑的合成包括如下步骤，

a.向一份(E)-2-苯乙烯基吲哚中加入二甲氧基乙烯中的2.2当量的NaH，产生第一反应混合物；

b.在23℃-25℃之间的温度搅拌所述第一反应混合物30min；

c.用烷化剂烷基化，其中所述烷化剂卤代烷在23℃-25℃之间的温度缓慢地加入，产生第二反应混合物，其中所述第二反应混合物由每当量(E)-苯乙烯基苯并咪唑1.5当量的烷化剂组成；

d.在氮气气氛下搅拌所述第二反应混合物6-24h；

e.在冰水浴中冷却所述第二反应混合物并加入水直到固体沉淀；和

f.在真空下过滤所述固体沉淀，用1∶1丙酮/己烷混合物洗涤并风干。