[发明专利]组织分析

说明书

技术领域

本发明涉及组织分析领域，特别涉及体外组织分析的方法，组织分析方法的应用和用于组织分析的试剂盒。

背景技术

在进入昂贵并且潜在高危险的人体临床试验前，药物开发项目目前依赖于疾病的动物模型以评估新治疗药物的药效和毒性。这些动物系统的使用常常导致用于临床研发的候选组合物的不当选择，并导致花费多和相反的临床效果。

哮喘病和慢性阻塞性肺病（COPD）是常见病。它们是危害健康的一个重大原因，并对卫生经济造成沉重负担。这两种疾病的流行正在扩大，并且特别使人困扰是，与别的重大疾病（例如，心血管病）不同，COPD死亡率连续上升，预计到2020年将成为全球死亡的第三大原因。高达70%的具有这种情况的易患病病人的呼吸感染是由病毒引起，并存在引起严重的发病率和死亡率的潜在危险（Mallia, P. and S. L. Johnston. 2006. 胸科 130:1203-1210）。哮喘和COPD感染的恶化使得呼吸道发炎增加，导致临床上会出现急性症状，如肺功能减退，呼吸困难，以及生命质量测评的下降。此外，对COPD病人而言，病毒感染容易引起二次细菌感染（Wilkinson, T. M. et al. 2006.. 胸科 129:317-324），这种现象可能由与被病毒损坏的上皮细胞结合的细菌数量增加引起（Hakansson, A. et al. 199.. 感染免疫学. 62:2707-2714）。

重大的研究尝试投入在模拟人体内炎症发生过程的COPD动物模型的建立中。这需要采用慢性刺激物如烟草香烟（Maeno T, et al. J 免疫学 2007; 178(12): 8090-8096）或者细菌副产物如LPS（Meng QR, et al. 呼吸毒理学 2006; 18(8): 555-568）对呼吸道进行处理。几乎所有这些模型都专注于诱导肺气肿，但都只诱导出轻度的疾病（Churg A, Wright JL. 微生物学文稿集 2007; 14: 113-125），这些模型均未表现出在更为严重人体疾病中见到的与吸烟有关的发病过程。吸烟诱导的慢性支气管炎或急性恶化的动物模型也还未建立。利用动物模型进行感染研究由于引起病理改变（Xatzipsalti M, Papadopoulos NG. 微生物学文稿集 2007; 14:33-41）和感染机制（例如：鼻病毒的细胞结合所需要的ICAM-1（Staunton DE, et al. 细胞 1989; 56(5): 849-853）不存在于多数动物细胞中）中存在物种-特异性差异的事实而变得复杂化。尽管病毒诱导的哮喘恶化的人体模型已经被广泛利用（Papi A, et al. 药理学及制药 2007; 7(3): 259-265），除了在一项研究中利用感冒病毒以外（Mallia P, Johnston SL. 胸科 2006; 130(4): 1203-1210），这种方法没有在COPD中广泛应用。研究者们对通常是年纪较大的并且具有心血管并发症风险的病人身上引发急性恶化担心其安全性和伦理学问题。因此，在体内模型中的应用很可能仍然是困难的，特别是用于利用新的抗病毒治疗方法的概念研究的证明。

类似地，现有的哮喘恶化的动物模型几乎唯一地依赖于抗原攻击后的卵清蛋白的致敏作用，这种模型虽然在一定程度上模拟人体内过敏症的生理效应，但几乎肯定不遵循目前广泛认识的例如哮喘的疾病的复杂病理。

已通过利用支气管上皮细胞作简单的细胞培养进行了采用人体材料的研究。原代上皮细胞和气液界面（ALI）系统在哮喘病（Wark PA, J et al. 实验医学学报 2005; 201(6): 937-947）和COPD病中对病毒的反应提供了有价值的见解。然而，这些培养系统不能模拟上皮组织、免疫系统、病毒和呼吸道中环境刺激物之间相互作用的复杂性（Wilkinson TM, et al. 胸科 2006; 129(2): 317-324）。

发明内容

本发明的一个目标是提供一种改进的模拟疾病的方法和/或开发用于特定疾病的药物或者治疗方法的方法。

按照本发明第一方面，提供一种组织分析的方法，包括步骤：

-提供包括至少两种不同类型细胞的组织样本；

-将组织样本中的细胞与试剂体外接触；

-使细胞与三个或以上的用于区别三种或以上不同细胞类型和/或不同细胞状态的检测手段接触；

-检验检测手段从而确定样本中的不同细胞类型和/或不同细胞状态。

按照本发明另一方面，提供一种模拟疾病状态的方法，包括步骤：