[发明专利]检测获得性免疫的方法

权利要求书

1.组合物，其包含：

(a)多种V-区段引物，其中每种引物都包含与单个功能性V区段或一小族V区段互补的序列；以及

(b)多种J-区段引物，其中每种引物都包含与J区段互补的序列；

其中所述V区段引物和J-区段引物允许通过多重聚合酶链式反应(PCR)扩增TCR或IG CDR3区，从而产生足以对TCR或IG基因的多样性进行定量的多种扩增的DNA分子。

2.如权利要求1所述的组合物，其中每种V-区段引物都包含与单个Vγ区段或一族相似Vγ区段互补的序列，且每种J区段引物都包含与Jγ区段互补的序列，并且其中V区段引物与J-区段引物允许扩增TCRγCDR3区。

3.如权利要求1所述的组合物，其中每种V-区段引物都包含与单个Vδ区段或一族相似Vδ区段互补的序列，且每种J区段引物都包含与Jδ区段互补的序列，并且其中V区段引物与J-区段引物允许扩增TCRδCDR3区。

4.如权利要求1所述的组合物，其中每种V-区段引物都包含与单个Vα区段或一族相似Vα区段互补的序列，且每种J区段引物都包含与Jα区段互补的序列，并且其中V区段引物与J-区段引物允许扩增TCRαCDR3区。

5.如权利要求1所述的组合物，其中每种V-区段引物都包含与单个Vβ区段或一族相似Vβ区段互补的序列，且每种J区段引物都包含与Jβ区段互补的序列，并且其中V区段引物与J-区段引物允许扩增TCRβCDR3区。

6.如权利要求1所述的组合物，其中所述V区段具有相似的退火强度。

7.如权利要求1所述的组合物，其中所有J区段引物均与相同的保守框架区基序退火。

8.如权利要求1所述的组合物，其中所述扩增的DNA分子从所述保守基序开始，在诊断上鉴定所述J区段，并且包含连接并延伸入所述V区段。

9.如权利要求1所述的组合物，还包含一组测序寡核苷酸，其中所述测序寡核苷酸与所述扩增的DNA分子内的区域杂交。

10.如权利要求1所述的组合物，其中所述扩增的DNA跨越V-D-J连接。

11.如权利要求1所述的组合物，其中所述V-区段或J-区段经选择含有利用密切相关序列的合并的序列错误校正。

12.如权利要求1所述的组合物，还包含用于从mRNA产生cDNA的通用C区段引物。

13.如权利要求5所述的组合物，其中所述V区段引物锚定在Vβ区段中相对于重组信号序列(RSS)的第-43位。

14.如权利要求5所述的组合物，其中所述多种V区段引物由至少14种对14种不同的Vβ基因具有特异性的引物组成。

15.如权利要求5所述的组合物，其中所述V区段引物具有选自SEQ ID NOS：1-45的序列。

16.如权利要求5所述的组合物，其中所述V区段引物具有选自SEQ ID NOS：58-102的序列。

17.如权利要求5所述的组合物，其中每个Vβ区段或一族Vβ区段都具有V区段引物。

18.如权利要求5所述的组合物，其中所述引物不跨越内含子/外显子边界。

19.如权利要求5所述的组合物，其中所述J区段引物与所述Jβ区段的保守元件杂交，并且具有相似的退火强度。

20.如权利要求5所述的组合物，其中所述多种J区段引物由至少5种对5种不同的Jβ基因具有特异性的引物组成。

21.如权利要求5所述的组合物，其中所述J区段引物具有选自SEQ ID NOS：46-57和483的序列。

22.如权利要求5所述的组合物，所述J区段引物具有选自SEQ ID NOS：103-113、468和484的序列。

23.如权利要求5所述的组合物，其中每个Jβ区段都具有J区段引物。