[发明专利]产生产量大大提高的PHB缺陷型鞘氨糖（定优胶）的鞘氨醇单胞菌菌株

权利要求书

1.鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)的突变菌株，所述突变菌株包含：

至少一种基本上或完全清除聚羟基丁酯(PHB)的产生的遗传修饰；

至少一种导致增加的鞘氨糖产生的遗传修饰，所述遗传修饰包括提高参与鞘氨糖合成的至少一种基因的表达的遗传修饰，其中所述参与鞘氨糖合成的至少一种基因选自由质粒pS8中的插入物(SEQ ID NO：1)、质粒pX6中的插入物(SEQ ID NO：54)、菌株ATCC PTA-10102所含质粒中的插入物、菌株ATCC PTA-10103所含质粒中的插入物所含基因及其鞘氨醇单胞菌同源物组成的组；

借此，所述鞘氨醇单胞菌属的突变菌株能够相对于含有所述至少一种基本上或完全清除PHB的产生的遗传修饰并缺少所述至少一种导致增加的鞘氨糖产生的遗传修饰的同类系菌株，产生增加的大致上无PHB的鞘氨糖产生。

2.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述鞘氨糖选自由定优胶、S-7、结冷胶、S-88、威兰胶、鼠李胶、S-198、NW-11和阿卡兰胶组成的组。

3.如权利要求2所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述鞘氨糖是定优胶。

4.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述参与鞘氨糖合成的至少一种基因选自由以下组成的组：鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)ATCC 53159基因dpsS、dpsG、dpsR、dpsQ、dpsI、dpsK、dpsL、dpsJ、dpsF、dpsD、dpsC、dpsE、dpsM、dpsN、atrD、atrB、dpsB、rmlA、rmlC、rmlB、rmlD、orf7、orf6、orf5和其鞘氨醇单胞菌同源物。

5.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中参与鞘氨糖合成的至少一种基因的所述鞘氨醇单胞菌同源物衍生自选自由多沼鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas elodea)ATCC 31461、鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)ATCC 31555、鞘氨醇单胞菌ATCC 31961、鞘氨醇单胞菌ATCC 53159、鞘氨醇单胞菌ATCC 31554、鞘氨醇单胞菌ATCC 31853、鞘氨醇单胞菌ATCC 21423、鞘氨醇单胞菌ATCC 53272和鞘氨醇单胞菌FERM-BP2015组成的组的鞘氨醇单胞菌物种。

6.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述至少一种导致增加的鞘氨糖产生的遗传修饰选自由以下组成的组：

(i)参与鞘氨糖合成的至少一种基因与异位启动子的可操作连接；

(ii)参与鞘氨糖合成的至少一种基因的每细菌染色体的拷贝数增加；和

(iii)其任意组合，

其中所述参与鞘氨糖合成的至少一种基因中的每一种为细菌染色体或染色体外元件所包含。

7.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述至少一种基本上或完全清除PHB的产生的遗传修饰是使选自由phaA基因、phaB基因和phaC基因或其组合组成的组的基因组成性或条件性失活或缺失的突变。

8.如权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述至少一种基本上或完全清除PHB的产生的遗传修饰是使phaC基因失活的插入或缺失。

9.如权利要求3所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述鞘氨醇单胞菌属的突变菌株能够以至少约0.15g/L/小时的速率产生定优胶或产生至少约12g/L的定优胶产量。

10.如权利要求3所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述鞘氨醇单胞菌属的突变菌株能够以至少约0.2g/L/小时的速率产生定优胶或产生至少约15g/L的定优胶产量。

11.如权利要求3所述的鞘氨醇单胞菌属的突变菌株，其中所述鞘氨醇单胞菌属的突变菌株将定优胶的产生速率或产量相对于含有所述至少一种基本上或完全清除PHB的产生的遗传修饰并缺少所述至少一种导致增加的鞘氨糖产生的遗传修饰的同类系菌株，提高至少约50％。