[发明专利]检测膀胱癌或者膀胱癌风险的方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测患者中膀胱癌存在情况或者膀胱癌风险的方法。

背景技术

膀胱癌是全世界范围内的重要死亡原因之一。膀胱癌在男性中是在女性中的3倍以上，但女性中的死亡率是男性中的两倍。患有浅表性膀胱癌肿瘤的大多数患者将会在5年内出现复发，这些患者中几乎90％将会在15年内复发。因此，至关重要的是定期随访这些患者，以确保癌症不会扩散到膀胱外。持续监测和昂贵的诊断技术使得膀胱癌是以每名患者花费计从确诊到死亡期间花费最昂贵的癌症。

诊断测试的有效性是通过其敏感性和特异性进行测量。测试敏感性是真阳性数(对具体疾病测试阳性的患有该疾病的个体数目)，特异性是真阴性数(对疾病测试阴性的未患该疾病的个体数目)。最常见的膀胱癌体征是肉眼可见的血尿或显微镜可见的血尿，通常由家庭医生检测，并且出现在所有膀胱癌患者的85％中。简单的尿试纸测试可用于检测血的存在情况。虽然无血的癌症很少，这使得简单血试纸测试具有高敏感性，但是该测试的特异性很差，仅有不到5％的有血尿患者实际上患有膀胱癌。然而，所述5％的有血尿的患者通常被诊断为患有易于切除的浅表性肿瘤。

膀胱镜检查和细胞学(cytology)是用于诊断膀胱癌的优选方法。细胞学检查涉及检查排泄的尿中的膀胱上皮细胞。该方法具有高特异性，并且样品便于获得。然而，该方法敏感性差，在低细胞产率下具有主观性。细胞学评估通常与灵活的膀胱镜检查相结合。膀胱镜检查使得可直接观察膀胱以及生检可疑区域，形成95％的诊断准确性。因此，该方法被认为是准确诊断膀胱癌的黄金标准。

然而，膀胱镜检查有几项缺点，即它特别昂贵，造成患者不适，并且不能用于上尿路(upper tract)可视化或用于检测小面积的原位癌。本领域中已经尝试鉴别一种或多种生物化学的膀胱癌生物标记物，所述生物标记物能够在对患有膀胱癌的患者进行膀胱镜检查之前对他们进行鉴别。如今，大约20％的患者存在重病，结果是他们的预后较差。因此，本领域中已经试图鉴别经证明的标记物或者标记物组，这些标记物或标记物组可用作用于高风险无症状患者的膀胱癌筛查工具。

仍没有单一生物标记物或生物标记物组已经达到了降低准确诊断需要的膀胱镜检查频率所需要的敏感性和特异性水平。在过去10年间，已经相对于黄金标准尿细胞学评估了大量膀胱癌标记物包括BTA STAT、NMP22、端粒酶和FDP，一直具有十分一致的低特异性结果。这些标记物存在于大部分患有除膀胱癌之外的泌尿疾病的患者以及患有泌尿道感染(urinary infection)的患者的尿中。NMP22和BTA被FDA批准用作即时检验测定(point of care assay)。然而，NMP22需要在尿中立即稳定，这不是总能做到，并且BTA的存在可被存在于尿中血所掩盖。新的推定标记物(例如存活素、透明质酸、细胞角蛋白8、细胞角蛋白18和EGF)--它们已被证明可诱导某些膀胱癌细胞中基质金属蛋白酶(MMP9)表达--已经被提出作为膀胱癌标记物。然而，所述推定生物标记物均尚未达到尿细胞学的高特异性和端粒酶测定的高敏感性。

因此，在膀胱癌诊断和治疗领域中，现有技术中鉴别的生物标记物不能使人满意，原因是它们缺乏准确诊断膀胱癌或评估患者患膀胱癌风险所需的敏感性和特异性。结果是，临床医生不能正确评估是否应对患者进行进一步的膀胱镜检查和细胞学测试，这导致了诊断和处理所述疾病的高额费用。本发明的目标是克服这些问题。

发明内容

本发明的目标是鉴别这样的生物标记物，即该生物标记物可以通过替代膀胱镜检查作为细胞学的辅助方法用于诊断膀胱癌，或者作为独立式测试用于诊断膀胱癌。本发明人已经发现，具体生物标记物的组合(已知在膀胱癌发生的生物化学通路中是重要的)存在于膀胱癌患者的血和/或尿中。通过对这些生物标记物的多种组合(考虑膀胱癌的多种已知风险因素)的统计学分析，本发明人已经发现，尿和/或血液样品中存在这些生物标记物的特定组合显示出与这些膀胱癌患者的强相关性。因此，本发明公开了可以用于诊断患者中膀胱癌或膀胱癌风险的具体生物标记物组合。

因此，本发明的一个方面提供了一种用于检测患者中膀胱癌或膀胱癌风险的方法，包括以下步骤：在从患者分离的一个或多个样品中检测选自CEA、VEGF、IL-8、NGAL、NSE、IL-2、EGF、TM、d-二聚体、MMP-9、IL-6、IL-4、MMP-9/NGAL、FAS、CRP、TUP和NMP22的至少两种生物标记物的存在情况，其中在一个或多个样品中存在至少两种所述生物标记物的组合表示存在膀胱癌或膀胱癌风险。

具体实施方式