[发明专利]抗炎细菌

说明书

相关申请的交叉引用

本专利申请要求于2009年6月4日提交的美国临时专利申请号61/184,226以及于2009年8月7日提交的美国临时专利申请号61/232,106的优先权，上述每篇临时申请通过引用并入用于所有目的。

发明背景

导管素(cathelicidin)抗微生物肽是在多形核白细胞(PMNs)的溶酶体中发现的多肽家族。导管素抗微生物多肽家族的成员的特征在于高度保守的区域(cathelin结构域)和高度可变的导管素肽结构域。导管素肽已经从多种不同种类的哺乳动物中分离出。导管素最初在嗜中性粒细胞中发现，但到目前为止已在许多其它细胞中发现，包括被细菌、病毒、真菌或激素1，25-D激活的上皮细胞和巨噬细胞。

LL-37是人类导管素蛋白。基因产物被合成为前肽(命名为“hCAP-18”)。参见，例如，Agerberth et al.，Proc Natl Acad Sci USA 92：195-199(1995)。该前肽在细胞外被切割从而产生LL-37(Gudmundsson et al.，Eur J Biochem 238：325-332(1996))，LL-37具有广谱的抗微生物活性。参见，例如，Chromek，et al.，Nature Medicine 12(6)：636-641(2006)。

在质粒中编码的人类导管素(LL-37)能够促进大鼠胃的溃疡愈合。该肽本身能够通过转化生长因子α/表皮生长因子受体途径增加胃上皮细胞增殖。参见，Yang，Y.H.，et al.，J.Pharmacol.Exp.Therap.318：547-554(2006)。已表明导管素对小鼠溃疡性结肠炎有抗炎作用。参见，Tai，E.K.K.，et al.，Exp.Biol.Med.232，799-808(2007)。

发明概述

本发明提供了分泌生物活性导管素的转化的乳酸菌。在一些实施方案中，乳酸菌选自乳球菌属(Lactococcus sp.)、乳杆菌属(Lactobacillus sp.)和双歧杆菌属(Bifidobacterium sp.)。在一些实施方案中，细菌是乳球菌(Lactococcus)。

在一些实施方案中，导管素的表达受诱导型启动子的调控。

在一些实施方案中，细菌包含导管素的核酸编码序列，并且该编码序列的密码子已被改良用于所述细菌种类。

在一些实施方案中，导管素与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2基本上一致(例如，至少80％一致)。

本发明还提供了通过给予足以减少哺乳动物胃肠道中的炎症的量的本文描述的乳酸菌来减少哺乳动物胃肠道炎症的方法。

在一些实施方案中，每天给予哺乳动物10⁸至10¹²CFU的细菌。在一些实施方案中，每天给予哺乳动物大于10¹⁰CFU的细菌。在一些实施方案中，给予细菌至少3天。在一些实施方案中，每天给予细菌，总共不超过7、10或14天。

在一些实施方案中，细菌在限定性体外培养条件下，以至少1pg/天的量分泌导管素。

在一些实施方案中，乳酸菌选自乳球菌属、乳杆菌属和双歧杆菌属。在一些实施方案中，细菌是乳球菌。

在一些实施方案中，哺乳动物患结肠炎或肠炎性疾病。在一些实施方案中，哺乳动物患克罗恩氏病(Crohns’disease)。在一些实施方案中，哺乳动物患结直肠癌或胃癌。在一些实施方案中，哺乳动物患有选自胃炎、胃溃疡或胃食管反流病(GERD)的疾病状态。

在一些实施方案中，导管素的表达受诱导型启动子的调控，并且该方法还包括给予足量的诱导子以诱导启动子在动物肠道内的表达。

在一些实施方案中，经口给予细菌。

在一些实施方案中，细菌与导管素肽共给药。

在一些实施方案中，导管素与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2基本上一致(例如，至少80％一致)。

在一些实施方案中，哺乳动物是人。

本发明还提供了包含足以减少哺乳动物胃肠道中的炎症的量的本文所述的乳酸菌的食品。

在一些实施方案中，食品是饮料或半固体产品。在一些实施方案中，半固体产品是酸乳。

在一些实施方案中，导管素的表达受诱导型启动子的调控，以及食品还包含足量的诱导子以诱导启动子的表达。