[发明专利]病理学形态分析的细胞阵列质量控制装置

说明书

技术领域

本发明是关于制造和使用载有低密度细胞阵列的质量控制玻片的方法。因为载玻片上的培养细胞的特性是已知的或可以通过研究知道，这些细胞可以被用作组织病理学检测的阳性或阴性对照。这些病理学检测包括免疫组织化学(IHC)，免疫细胞化学(ICC)，原位杂交(ISH)，和细胞遗传学分析。细胞阵列质量控制载玻片可以代替常常难以得到的组织制成的量控制玻片。

背景技术

病理学检测，诸如IHC，ICC，和ISH，被用在病人标本上做例行的癌症诊断和预测。一般IHC，ICC和ISH检测需要进过许多步骤，包括获得生物标本，在福尔马林中固定标本，处理标本以达到脱水和透明目的，在石蜡中包埋标本，系列切片并载于显微玻片上。接下来还要进行脱蜡(在二甲苯，酒精和水中处理)，最终进行各种反应。反应包括将一系列的溶液，如酶，第一抗体，第二抗体，检测试剂，显色剂，滴于组织切片上，保温并洗脱。反应完成后，组织切片被置于显微镜下观察。

传统的活检样本的显微观察显示的是总体的细胞和组织架构。例如，在常用的苏木和伊红染色(H&E)下，细胞核被染成紫色(苏木染色)，细胞质被染成红色(伊红染色)。然而，从H&E染色得出的信息常常不足于做准确的诊断。IHC和ISH检测的结果可以把对组织样本的细胞大小和形状分析扩展到分子水平。用抗体和核酸探针可以检测组织样本中特定的蛋白和基因的表达。某些检测靶标或生物标志物的存在与否可以表明肿瘤的谱系，有助于诊断或对特定抗肿瘤疗法的预后。另外，这些方法也可用于检测微生物，如细菌，真菌，和病毒。

大多数病理实验室用事先确定含有特定抗原的组织标本作IHC的阳性对照。这需要对一组用作IHC阳性对照的组织标本进行登记，切片和存档。当阳性组织样本用完时需要准备新的。在日常IHC检测过程中每一个抗体需要一个阳性组织对照。如此每一种抗体都在一特定浓度进行验证。

作为一种改进，Battifora(美国专利4,820,504and 5,610,022)阐述了把多个阳性组织样本(多为肿瘤组织样本)一起包埋在一个石蜡块里，同时作为对照的方法。这种“多组织肿瘤蜡块”简化了阳性对照组织的切片过程。Furmanski等人阐述了一种略微不同的方法制备“多组织肿瘤蜡块”(U.S.Pat.No.4,914,022)。它们的改进在于把用普通饮料吸管从多个原组织中切出的组织芯包埋在一个石蜡块中。

然而，使用组织作为对照给组织学技师造成很大负担，因为必须收集多余组织样本，制备对照玻片，并对它们的抗原特性进行分析。许多研究者使用过非组织材料，比如体外培养的细胞甚至多肽。许多研究者和IHC诊断试剂盒的生产商把已知染色特性的细胞点在载玻片上作为阳性或阴性对照。Moskaluk等人(C.A.Moskaluk and M.H.Stoler，Diagnostic Molecular Pathology，2002，p234-238)阐述了把培养细胞包埋在琼脂糖中制成多细胞系的细胞阵列置于载玻片上。朱(美国专利7,598,036)阐述了将蛋白质，核酸，或体外培养细胞直接点在玻片上，或者先点在特制的膜上再将膜与检测样品一起贴在显微玻片上用作外来对照。阐述了一种用以共价键联在固体支持物上的多肽作为IHC对照的方法。

发明内容

本发明有关于一种在免疫和分子病理学检测中进行质量控制的以细胞阵列为基础的广谱质量控制装置以及生产和使用此装置的方法。

本发明的一个方面是质量控制细胞阵列。细胞阵列由多种细胞构成的多个独立分散的区域(点)构成。细胞阵列包含的细胞可以是正常细胞，也可以是良性或恶性肿瘤细胞。质量控制细胞阵列的一个实施方式是包括由来源于多种肿瘤或癌类型(carcinoma癌，melanoma黑色素瘤，sarcoma肉瘤，leukemia/lymphoma血癌/淋巴瘤，and tumors of the neural system和神经系统肿瘤)的培养细胞组成的分开的细胞点。一种细胞或几种细胞的混合物被点在一个固体支持物的表面上的一个独立的区域内，这个区域被称为细胞点。细胞阵列由多个细胞点组成，可置于显微玻片表面或置于可贴在微玻片表面的胶片或薄膜上。

本发明的一个实施方式是质控细胞阵列包括从癌组织中分离出的细胞系。本发明的另一个实施方式是质控细胞阵列包括从淋巴瘤组织中分离出的细胞系。本发明的另一个实施方式是质控细胞阵列包括从黑色素瘤，肉瘤，或神经系统肿瘤中分离出的细胞系。

本发明的另一个实施方式是质控细胞阵列包含微生物感染的或表达微生物基因的细胞。