[发明专利]针对TOLL样受体2的人源化的抗体及其用途

说明书

发明领域

本发明涉及完全人源化的抗体和其片段，且尤其涉及对Toll样受体2(TLR2，TLR-2)具有结合特异性的完全人源化的抗体。本发明还延伸到所述完全人源化的抗体用于治疗和预防由Toll样受体2激活和信号传递介导的炎性疾病和自身免疫疾病的用途。

发明背景

Toll样受体(TLR)形成一个模式识别受体的家族，所述模式识别受体在调节先天免疫反应中具有重要作用，它们还参与组织修复，维持组织完整性和肿瘤发生。至今在人类中已鉴定了11种Toll样受体。Toll样受体家族的成员是高度保守的，且绝大多数哺乳动物物种具有10到15种之间的Toll样受体。每种Toll样受体识别特定的病原体相关分子标签。Toll样受体2(TLR2，CD282，TLR-2)可通过肽聚糖、脂蛋白、脂磷壁酸和内源性配体来激活。

对Toll样受体2具有结合特异性的许多单克隆抗体是已知的。WO01/36488公开了命名为TL2.1的抗体，其来源于根据布达佩斯条约以登录号99102832保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)的杂交瘤细胞系。该抗体拮抗表达于人类细胞的Toll样受体2的激活。

WO 2005/028509公开了命名为T2.5的鼠单克隆抗体，其特异性地抑制哺乳动物TLR2的激活。显示T2.5单克隆抗体可与TLR2的人类形式和鼠类形式二者交叉反应。该文献还含有实验数据，其表明如WO 01/36488中所公开的鼠TL2.1抗TLR2单克隆抗体不可与TLR2的人类形式和鼠类形式二者交叉反应，如该专利申请的说明书中所述。相反地，WO2005/028509中显示TL2.1抗体仅与人类Toll样受体2结合而不与鼠Toll样受体2结合。WO 2005/028509的T2.5单克隆抗体针对TLR2的胞外域产生，且因此对Toll样受体2的该区域中的表位具有结合特异性。

WO 2005/019431公开了对于TLR2具有结合特异性的抗体，其被命名为11G7。该鼠抗体可来源于以名称PTA-5014保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)的杂交瘤细胞系11G7。11G7单克隆抗体选择性地结合TLR2的胞外域，并可阻遏利用激活Toll样受体1(TLR1)和TLR2之间形成的异源二聚体的激动剂刺激的人类外周血单核细胞(PBMC)进行的细胞因子产生的诱导。11G7抗体不抑制利用通过Toll样受体6(TLR6)和TLR2之间形成的异源二聚体诱导信号传递的激动剂刺激的PBMC进行的细胞因子产生。

已显示啮齿类单克隆抗体诸如鼠单克隆抗体用于体内治疗应用与被施用抗体的受治疗者生成的不期望的免疫反应的生成有关。所述免疫反应可导致有效地中和治疗性抗体的有效性的抗体的产生。所述免疫反应通常被称为人抗小鼠抗体(HAMA)反应。HAMA反应以多种方式来削弱被施用的抗体的治疗有效性，所述方式包括损害治疗性抗体到达其结合靶的能力，这削弱了抗体的治疗性作用。

已开发了许多方法来解决针对施用给个体的治疗性抗体产生的不想要的HAMA反应的问题。通常，这些方法包括导致利用来源于人类抗体的等效部分来替代小鼠抗体的某些组分的技术。所述方法可，例如，导致嵌合抗体的产生，所述嵌合抗体包括与人类来源的恒定区结合的小鼠可变区。可选地，可使用称为“CDR移植(CDR grafting)”的技术，其中将来自鼠抗体的互补决定区(CDR)移植到由人类抗体轻链可变域和重链可变域的区域所提供的构架中。这导致了保留鼠抗体的结合特异性，但其中仅有的非人类组分是移植的鼠CDR区的抗体的产生。

然而，在两种方法中，所得的人源化的抗体的治疗效力可能均受到损害。例如，嵌合抗体的鼠可变区组分仍可提供针对其发生HAMA反应的基础。并且，在产生CDR移植的人源化的抗体的地方，已观察到CDR区域的简单移植(transplantation)常由于抗体的结合亲和力的减小而导致抗体的降低的治疗效力。