[发明专利]由人参制备新型糖脂蛋白吉托宁的方法及由该方法制得的新型糖脂蛋白吉托宁无效
申请号: | 201080037316.8 | 申请日: | 2010-08-12 |
公开(公告)号: | CN102549010A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 罗承烈;表美景;崔善惠;李昞焕;辛太俊 | 申请(专利权)人: | 建国大学校产业协力团 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/16;A61K36/258 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 张晶 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人参 制备 新型 糖脂 蛋白 吉托宁 方法 法制 | ||
1.新型糖脂蛋白(glycolipoprotein)吉托宁(gintonins)的制备方法,其包括:
1)从人参中制备甲醇提取物的步骤;
2)用水和正丁醇的混合溶剂分离上述甲醇提取物的步骤;
3)使用氯甲烷∶甲醇∶水的混合溶剂作为洗脱溶剂,对上述水流分物和正丁醇流分物中的正丁醇流分物实施硅胶柱层析法,分离成8个流分的步骤;
4)使用乙醇∶乙酸乙酯∶水的混合溶剂作为洗脱溶剂,对上述8个流分物中相对于CaCC(钙激活氯离子通道(Ca2+-activated Chlo ride Channel))的活性最高的第7流分物实施硅胶柱层析法,分离成2个流分的步骤;及
5)透析上述2个流分物中CaCC活性高的流分物II,获得最终产物的步骤。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在上述步骤5)之后,还包括下列步骤的单独的吉托宁(gintonin)E1、E2、E3、L1、L2及L3的制备方法:
6)将最终流分物溶解于含有NaCl的pH7.2的磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffer saline;PBS)溶液中,实施阴离子交换层析法及凝胶过滤层析法后,分离成2个流分的步骤;及
7)将上述2个流分物分别用含有NaCl的pH8.2的Tris-HCl和含有NaCl的pH7.2的磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶液实施阴离子交换层析法,分离单独的糖脂蛋白的步骤。
3.根据权利要求1所述的新型糖脂蛋白(glycolipoprotein)吉托宁(gintonins)的制备方法,其特征在于,所述人参选自红参、水参、白参、栽培参、长脑参及山参。
4.从人参中分离鉴定的新型糖脂蛋白吉托宁E1、E2、E3、L1、L2及L3,其特征在于,由权利要求2的方法制得,分子量为67kDa,是表观分子量为13kDa的五聚体(pentamer)。
5.根据权利要求4所述的从人参中分离鉴定的新型糖脂蛋白吉托宁,其特征在于,所述糖脂蛋白含有作为氨基酸组成成分的半胱氨酸和胱氨酸(cysteine and cystine)、天冬酰胺和天冬氨酸(asparagine and aspartic acid)、谷氨酰胺和谷氨酸(glutamine and glutamic acid)、丝氨酸(serine)、甘氨酸(glycine)、精氨酸(arginine)、苏氨酸threonine)、丙氨酸(alanine)、脯氨酸(proline)、缬氨酸(valine)、异亮氨酸(isoleucine)、亮氨酸(leucine)、苯基丙氨酸(phenylalanine)、色氨酸(tryptophan)及赖氨酸(lysine)。
6.根据权利要求4所述的从人参中分离鉴定的新型糖脂蛋白吉托宁,其特征在于,所述糖脂蛋白含有作为碳水化合物组成成分的鼠李糖(rhamnose)、阿拉伯糖(arabinose)、葡萄糖(glucose)、甘露糖(mannose)、木糖(xylose)、氨基葡萄糖(glucosamine)。
7.根据权利要求4所述的从人参中分离鉴定的新型糖脂蛋白吉托宁,其特征在于,所述糖脂蛋白含有作为脂质组成成分的亚油酸(linoleic acid)、棕榈酸(palmitic acid)、油酸(oleic acid)及硬脂酸(stearic acid)。
8.含有权利要求4的糖脂蛋白作为有效成分、用于对因钙浓度降低而引起的疾病的预防及治疗的药物组合物,其中,所述因钙浓度降低而引起的疾病选自:精神分裂(Schizophrenia)、阿尔兹海默症(Alzheimer′s Disease)、亨廷顿病(Hungtington′s Disease)、遗传性偏瘫型偏头痛(Familial hemiplegic migraine)、癫痫(Eilepsy)、发作性共济失调(episodic ataxia)、脊髓小脑共济失调(spinocerebellar ataxias)及因钙不足引起的成长阻碍。
9.含有权利要求4的糖脂蛋白及食品学上允许的食品辅助添加剂的健康功能食品。
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