[发明专利]用于增强植物中种子特异的和/或种子优先的基因表达的调节性核酸分子

权利要求书

1.用于产生高表达种子特异的和/或种子优先的植物启动子的方法，包括将一个或多个增强核酸表达的核酸(NEENA)分子与启动子功能性连接，其中所述增强核酸表达的核酸(NEENA)分子相对于所述启动子是异源的，其包含

i)具有如SEQ ID NO：1至15中所定义序列的核酸分子，或

ii)具有与SEQ ID NO：1至15具备至少80％同一性的序列的核酸分子，或

iii)i)或ii)的核酸分子的至少100个连续碱基的片段，所述片段具有如具有SEQ ID NO：1至15的序列的相应核酸分子那样的增强表达活性，或

iv)作为前述在i)或ii)下提及的任一核酸分子的互补物或反向互补物的核酸分子，或

v)使用表2中所示的SEQ ID NO：20至29、34至41、44至51和54至57描述的寡核苷酸引物，通过PCR可获得的核酸分子，或

vi)核酸分子，其在等同于50℃于7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5MNaPO₄、1mM EDTA杂交，以及50℃于2×SSC、0.1％SDS中洗涤的条件下与包含由SEQ ID NO：1至15或其互补物描述的增强转录的核苷酸序列的至少50个连续核苷酸的核酸分子杂交。

2.用于产生植物或其部分的方法，所述植物或其部分与相应的对照植物或其部分相比具有一种或多种核酸分子的增强的种子特异的和/或种子优先的表达，所述方法包括步骤

a)将包含权利要求1的i)至vi)中所定义核酸分子的一个或多个NEENA导入所述植物或其部分；

和

b)将所述一个或多个NEENA与种子特异的和/或种子优先的启动子以及与处在所述种子特异的和/或种子优先的启动子控制下的核酸分子功能性连接，其中NEENA对所述核酸分子为异源。

3.根据权利要求1和2所述的方法，包括步骤

a)将包含权利要求1的i)至vi)中所定义核酸分子的一个或多个NEENA导入植物或其部分，和

b)将所述一个或多个NEENA整合至所述植物或其部分的基因组中，从而所述一个或多个NEENA与相对所述一个或多个NEENA为异源的种子特异的和/或种子优先的表达的内源核酸功能性连接，和任选地

c)从所述转化的细胞再生出包含所述一个或多个NEENA的植物或其部分。

4.根据权利要求1至3所述的方法，包括步骤

a)提供包含一个或多个NEENA的表达构建体，所述NEENA包含权利要求1的i)至vi)中所定义的、与种子特异的和/或种子优先的启动子以及与相对于所述一个或多个NEENA为异源并处在所述种子特异的和/或种子优先的启动子控制下的一种或多种核酸分子功能性连接的核酸分子，和

b)将包含所述一个或多个NEENA的所述表达构建体整合至所述植物或其部分的基因组中，和任选地

c)从所述转化的植物或其部分再生出包含所述一个或多个表达构建体的植物或其部分。

5.根据权利要求1至4所述的方法，其中所述植物是单子叶或双子叶植物。

6.根据权利要求5所述的植物，其中所述植物是双子叶植物。

7.根据权利要求5所述的植物，其中所述植物是单子叶植物。

8.根据权利要求1至7所述的方法，其中所述一个或多个NEENA与靠近所述异源核酸分子的转录起始位点的种子特异的和/或种子优先的启动子功能性连接。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述一个或多个NEENA与距离所述异源核酸分子的转录起始位点2500bp或更少、优选地2000bp或更少、更优选地1500bp或更少、甚至更优选地1000bp或更少并且最优选地500bp或更少的种子特异的和/或种子优先的启动子功能性连接。

10.根据权利要求1至9所述的方法，其中所述一个或多个NEENA与核酸分子的翻译起始位点上游的种子特异的和/或种子优先的启动子功能性连接，所述核酸分子的表达处在所述种子特异的和/或种子优先的启动子的控制下。

11.根据权利要求1至9所述的方法，其中所述一个或多个NEENA与核酸分子的5’UTR内部的种子特异的和/或种子优先的启动子功能性连接，所述核酸分子的表达处在所述种子特异的和/或种子优先的启动子的控制下。