[发明专利]空间多维色谱法中进行的检测

说明书

本发明涉及一种色谱方法，在该色谱方法中，流动相穿过分离体，以分离包含在该相中的成分。

根据美国专利文献US 4,469,601，已知一种首先提供溶液组分的二维分离的色谱方法。这种显影(development)在二维板上执行。在该二维显影之后，板变干。然后，板紧靠立方体形的分离体放置。通过板将流动相垂直地引入到立方体中，并且在第三维方向上对组分进行分离之前将组分结合到板上。

该方法也可以从EP 0060709中获知。

这类方法是复杂的并且需要耗时处理，另外对在第三维上的成分的检测很困难。

因此，本发明的目的是提出一种简化的并且更加紧凑的三维色谱方法，该三维色谱方法能够特别容易地在第三维方向上检测成分。

该目的由在权利要求1中限定的色谱方法实现。

本发明基于如下思想：如果将(优选为一体式的)三维体用于在空间的三个方向上对独立的成分进行依次分离，则简化的三维色谱方法特别易于执行。与现有技术相反，没有必要依次将二维板和三维分离体放在一起。

而且，当所有的成分或者单独的成分从块(block)中流出时，根据本发明的方法允许精确地并且选择性地检测所述所有的成分或者单独的成分。两种特别合适的检测方法能够准确地再现色谱的三维结果。例如，能够再现具有在分离体中分离的成分的空间分布的所述分离体的精确的三维图像。在第三维方向上按照时间间隔对相继从分离体流出的成分进行检测也允许创建色谱结果的三维图像；这里，特定成分从分离体流出的时间点表示第三维。

在根据本发明的色谱方法中，至少一个流动相穿过分离体，该分离体在优选地彼此垂直的三个方向(X、Y、Z)上延伸。在各方向X、Y、Z上，该体具有能够被单独地预定的保留性能，以便于对以流动相传输的成分进行色谱分离。

根据本发明，分离体被在第一方向X上的至少一个流动相和在第二方向Y上的至少一个流动相同时穿透或者相继穿透，由此实现提供给分离体的样本的二维色谱分离。这样实现的分布基本上沿着平面X-Y延伸，该平面X-Y优选地形成分离体的侧面。

根据本发明，当分离体继而被在第三方向Z上的至少一个额外的流动相穿透时，之前已经在方向X-Y上被分离的成分在Z方向上经历针对不同位置的额外的空间分离，或者之前已经在方向X-Y上被分离的成分在洗脱剂中以它们在不同的时间点在边界表面处从分离体流出的方式经历额外的时间分离。

为了检测，根据本发明的方法提出：当成分在边界表面的区域中流出时，根据待预定的标准连续地或者在可固定的时间点检测这些成分。

相对于空间x空间x时间分离，该方法也能够利用优选地非常紧凑的分离体来详细地评估三维色谱的结果。

本发明提供以下内容：从分离体流出的成分被固定在合适的基板上。因而，通过使这些成分在基板上固定不动可以有利地检测这些成分，从而稍后能够利用合适的分析方法对具有这些成分的基板进行分析。作为基板，可以使用能够对从分离体的中显露出来分析物进行够粘着或固定的任何材料。作为优选地具有实质上平的边界表面的分离体(流动相或者成分通过所述边界表面离开分离体)，同样平的支撑物是合适的，以便于同时对横越整个边界表面而流出的介质进行吸收和固定。通过将边界表面印在基板上，可以具体地实现固定。以盖戳方式将在边界表面处流出的成分施加到基板，并且固定到基板。

出于此目的，分离体可以向相对静止的基板移动。另选地，基板例如可以紧靠分离体的边界表面放置，像紧盖戳的纸一样。按此方式，能够拍摄特定时间点t处的成分的精确的二维图像，这些成分在特定时间点t通过分离体的边界表面流到外面。这种以可预定义的时间间隔重复的“盖戳”形式由此提供了这些成分如何随着时间(这里，时间表示第三维)的推移而离开分离体的三维图像。这种盖戳处理能够随着时间的推移永久地固定色谱法的单独的结果。固定在基板上的图像能够通过分析方法来评估，以便于能够在各单独的印痕上记录单独的成分的分布。在已知分析方法中，特别地使用可见光、紫外光或者红外光。借助于拉曼光谱法或者质谱成像技术，对在基板上存储的图像的评估也可能很容易。

合适的是，针对上述方法，将分离体配置成单片式的。可以针对对成分的深思熟虑的不同选择来对每个维度定义不同的保留机制，该保留机制在分离体的单独的维度中可能是必须的。这种单片式构造允许在比较小的空间内特别容易且紧凑地制造分离体。