[发明专利]用于细胞内药物递送的Fas(Apo-1，CD95)靶向平台

说明书

本发明涉及药物递送领域。更具体地，本发明涉及靶向递送运载体(delivery vehicle)或药物载体，并涉及其在治疗和诊断应用中的用途。优选地，根据本发明的运载体或载体对其靶细胞具有高度特异性并可提供药学活性剂或可检测标记的有效的细胞内递送。在一个实施方案中，本发明提供了将药学活性剂或可检测标记特异性地递送至Fas配体表达细胞的运载体。本发明延伸到组合物及在治疗中特别是在瘤和神经障碍的治疗或预防中的用途。

当前，大多数药物为全身施用。对于大多数治疗剂，大部分药物通过全身清除从身体中排除，同时仅小部分药物达到靶器官或靶组织。而且，健康组织和器官对施用的药物的全身暴露可导致严重毒性。毒性的危险可被药物的高剂量和大容量加重，而高剂量和大容量是克服差的生物利用度并在受治疗者中提供充足的分布所需要的。相反，靶向药物递送设法将药物聚集在目标组织或器官中，而最小化全身药物暴露。然而，用于靶向药物递送的现有的系统并不理想，且当前的药物治疗策略不足以解决与全身药物暴露相关的毒性问题。这在癌症治疗领域中尤其如此，癌症治疗中，细胞毒性抗癌药物可损害健康组织而引起严重的副作用。因此，对选择性地将药物递送至靶组织或靶器官的靶向药物递送策略存在迫切需要。这样的策略应当通过增加药物的治疗指数而同时最小化药物相关毒性的危险而改善药物治疗的效力。

此外，增加的基因组学、表观基因组学和蛋白组学知识结合新治疗策略诸如RNA干扰(Mello&Conte，2004；Grimm，2009)或基于肽的细胞内调质(Sawyer TK，2009)改变着治疗疾病的潜力。特别地，希望制造能够对细胞内靶标起作用的小分子或较大生物药物，以便例如选择性地治疗单独细胞类型或破坏如癌症中发现的异常细胞。然而，细胞内活性药物候选者由于其不能穿过细胞膜以与其细胞内靶分子相互作用而通常未能成为药学上有用的。细胞膜是脂双层，其通常作为隔离细胞内环境与细胞外(或外部)环境的半渗透屏障。当前的用于运输药物穿过细胞膜的递送系统不像其可能的那样有效和可靠。因此，对有效的细胞内药物递送系统存在需求。

根据本发明的第一个方面，提供了用于将药学活性剂或标记递送至细胞的递送运载体，包括特异性针对Fas配体的配体结合部分和药学活性剂或标记的载体。

递送运载体可以是包括特异性针对Fas配体的配体结合部分和药物载体的药物递送运载体。配体结合部分可将根据本发明的递送运载体靶向于Fas配体表达细胞。因此，递送运载体可提供药学活性剂、标记或药物的细胞内递送。药学活性剂、标记或药物优选地不是能够特异性结合Fas配体的剂。

根据本发明的载体可以是微粒、纳米颗粒、微胶囊、微球、胶束或脂质体。优选地，载体是微粒。微粒可具有达0.01μm、0.05μm、0.1μm、0.2μm、0.5μm、1μm、2μm、5μm或10μm的平均直径。微粒可具有在0.1μm和10μm之间的平均直径，优选地在0.2μm和5μm之间，更优选地在0.3μm和2μm之间，更加优选地在0.4μm和1.5μm之间，且最优选地在0.5μm和2μm之间。微粒可包括乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)基质。

特异性针对Fas配体的运载体的配体结合部分可包括Fas受体或其衍生物。其还可以是全长Fas蛋白或其片段。配体结合部分可包括Fas蛋白的胞外域或其片段或由Fas蛋白的胞外域或其片段组成，且优选地包括Fas蛋白的配体结合域或由Fas蛋白的配体结合域组成。运载体的配体结合部分可以是肽、蛋白质、适体、抗体、抗体片段、融合蛋白或嵌合蛋白质。配体结合部分可以是Fas蛋白或其片段，与免疫球蛋白的可结晶片段区(Fc区)融合以形成嵌合融合蛋白，即Fas-Fc。优选地，免疫球蛋白是人免疫球蛋白，诸如IgG1。运载体可包括特异性针对Fas配体的多个配体结合部分，且所述多个配体结合部分的每一个可以是前述实例的任何一个。

配体结合部分或每个配体结合部分可以为任何起源，但优选是人类或鼠类或其组合。

配体结合部分或每个配体结合部分可通过表面吸收(surfaceabsorption)、吸附、化学轭合(chemical conjugation)或基质掺入而与载体偶联(特别是微粒时)，或共价地或非共价地与载体缔合(尤其是当载体是微粒时)。配体结合部分或每个配体结合部分可通过连接分子与载体偶联。连接分子可以是免疫球蛋白的可结晶片段区(Fc)，优选人免疫球蛋白，诸如IgG1。