[发明专利]葡糖淀粉酶的变体

权利要求书

1.相对于下述包含两个或更多个氨基酸取代的葡糖淀粉酶变体用于在淀粉水解的过程中减少缩合产物的合成的用途：具有SEQ ID NO：2的518位至543位的氨基酸序列或亲本葡糖淀粉酶中等同的残基序列的互联环2’，和/或具有SEQ ID NO：2的21位至51位的氨基酸序列或亲本葡糖淀粉酶中等同的残基序列的环1，和/或具有SEQ ID NO：2的52位至68位的氨基酸序列或亲本葡糖淀粉酶中等同的残基序列的螺旋2，和/或具有SEQ ID NO：2的396位至420位的氨基酸序列或亲本葡糖淀粉酶中等同的残基序列的环11，和/或具有SEQ ID NO：2的421位至434位的氨基酸序列或亲本葡糖淀粉酶中等同的残基序列的螺旋12。

2.根据权利要求1的葡糖淀粉酶变体用于在淀粉水解的过程中减少缩合产物的合成的用途，其中所述葡糖淀粉酶变体的晶体形式具有这样的晶体结构：在将等同的主链原子进行比对后，其主链原子的原子坐标与TrGA的等同主链原子的原子坐标(如WO2009/067218的表20中所定义的)的均方根偏差小于0.13nm；并且所述变体具有连接子区域、淀粉结合结构域以及催化结构域，所述变体相对于亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列在淀粉结合结构域的互联环2’中，和/或催化结构域的螺旋12中、和/或环1中、和/或螺旋2中、和/或环11中包含两个或更多个氨基酸取代。

3.根据权利要求1-2中任一项的葡糖淀粉酶变体的用途，其中所述两个或更多个氨基酸取代是相对于下述的：具有SEQ ID NO：2的518位至543位的氨基酸序列的互联环2’，和/或具有SEQ ID NO：2的21位至51位的氨基酸序列的环1，和/或具有SEQ ID NO：2的52位至68位的氨基酸序列的螺旋2，和/或具有SEQ ID NO：2的396位至420位的氨基酸序列的环11，和/或具有SEQ ID NO：2的421位至434位的氨基酸序列的螺旋12。

4.根据权利要求1-3中任一项的葡糖淀粉酶变体的用途，其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和环1和/或螺旋2和/或环11和/或螺旋12中的至少一个氨基酸取代。

5.根据权利要求1-4中任一项的葡糖淀粉酶变体的用途，其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的1、2、3或4个氨基酸取代和环1和/或螺旋2和/或环11和/或螺旋12中的1、2、3或4个氨基酸取代。

6.根据权利要求1-5中任一项的葡糖淀粉酶变体的用途，其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和环1中的至少一个氨基酸取代，和/或其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和螺旋2中的至少一个氨基酸取代，或其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和环11中的至少一个氨基酸取代，或其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和螺旋12中的至少一个氨基酸取代，其中所述两个或更多个氨基酸取代是互联环2’中的至少一个氨基酸取代和环1中的至少一个氨基酸取代以及螺旋2中的至少一个氨基酸取代。

7.根据权利要求1-6中任一项的葡糖淀粉酶变体的用途，其中所述葡糖淀粉酶变体在互联环2’的520-543、530-543或534-543位中具有至少一个氨基酸取代，所述位置相应于SEQ ID NO：2中的各位置或亲本葡糖淀粉酶中的等同位置，和/或其中所述葡糖淀粉酶变体在环1的30-50、35-48或40-46位的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，所述位置相应于SEQ ID NO：2中的各位置或亲本葡糖淀粉酶中的等同位置，和/或其中所述葡糖淀粉酶变体在螺旋2的50-66，55-64或58-63位的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，所述位置相应于SEQ ID NO：2中的各位置或亲本葡糖淀粉酶中的等同位置，和/或其中所述葡糖淀粉酶变体在环11的405-420、410-420或415-420位的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，所述位置相应于SEQ ID NO：2中的各位置或亲本葡糖淀粉酶中的等同位置，和/或其中所述葡糖淀粉酶变体在螺旋12的421-434、425-434或428-434位的氨基酸序列中具有至少一个氨基酸取代，所述位置相应于SEQ ID NO：2中的各位置或亲本葡糖淀粉酶中的等同位置。