[发明专利]活性酯化多糖及其制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及活性酯化多糖及其制造方法。

背景技术

在多件文献中公开了向生物适合性高的多糖的侧链中导入交联性基团而形成的多糖衍生物可作为生物适合材料使用。其中，使向多糖的侧链中导入的羧基与亲电子性基团酯化，通过与含活性氢的基团接触，该酯键解离，由此羧基参与交联，具有上述结构的活性酯化多糖具有自交联性，尤其是可用作防粘连材料、止血材料、医疗用粘合材料等各种生物适合材料(参见专利文献1等)。

上述活性酯基通常为酰亚胺酯，尤其是以琥珀酰亚胺酯为代表。作为多糖的活性酯化，对于在分子内具有羧基的透明质酸，也报道了利用透明质酸四丁铵盐与N-羟基琥珀酰亚胺二苯基磷酸盐的反应的、透明质酸的琥珀酰亚胺活性酯的合成方法等(参见非专利文献1)，但以往通常这样进行：首先，向在分子内不具有羧基的多糖的侧链中导入羧基制成酸型多糖，使该羧基与N-羟基酰亚胺进行脱水缩合而形成酯。使生成的活性酯化多糖在不良溶剂中析出结晶，然后减压干燥形成粉末，在使用时溶解在水中。

专利文献1：国际公开2004/81055号

非专利文献1：Y.Luo等，Bioconjugate Chem.2001，12，1085-1088

发明内容

在使作为生物适合材料有用性高的活性酯化多糖产品化时，存在这样的问题：将干燥产品的活性酯化多糖溶于水时，有时产生团块等不溶物。对于含有不溶成分的产品来说，虽然到目前为止在实验水平的研究上并未报道出现问题，但在谋求商业规模增加的方面首先导致出现品质上的问题，另外在生产效率方面也成为问题。因而期求在溶解于水中时不产生不溶物的品质稳定的活性酯化多糖、以及即使增大制造规模也可稳定地制造上述品质的活性酯化多糖的方法。

本发明人对上述问题进行了多种研究，结果发现，通过使酯反应结束后的反应液与多元羧酸接触，可解决干燥产品溶于水时产生不溶物的课题。另外，也已经确认了也可抑制在最终干燥工序和贮存时目标物质的平均分子量(Mw)经时上升。从而可确保实现规模扩大，从而完成本发明。

需要说明的是，在上述研究过程中，对于由以往的制造方法得到的活性酯化多糖来说，其干燥产品产生水不溶性成分时，在对该活性酯化多糖进行GPC测定时，在高分子侧出现肩峰(shoulder)，或者确认到肩峰变宽，显示生成了高分子量成分。利用IR光谱推测该高分子侧的肩峰级分为活性酯化多糖的氢键合物。上述高分子量成分的生成对平均分子量(Mw)变化的贡献率不一定很大，因此，即使生成不溶成分，也不能说Mw的值显著变大。反之，虽然Mw有一定程度的增加时也不能说一定生成不溶成分，但事实上一般认为由以往的制造方法得到的活性酯化多糖在减压干燥时和贮存时Mw有经时增加的倾向，另外也发现Mw的经时变化率不均。进而发现Mw在减压干燥时的增加比在贮存时的增加显著，以及，如果抑制Mw在减压干燥时的增加则可抑制Mw在贮存时的增加。因此，减压干燥时的Mw评价可视为包括贮存稳定性在内的产品稳定性的评价。

另一方面，对于在上述制造过程中与多元羧酸接触过的活性酯化多糖来说，可抑制最终干燥产品在溶于水时生成不溶物，在进行GPC测定时，未确认在峰上高分子侧出现明显的肩或者宽肩化。另外，也可确认起到抑制Mw在减压干燥时经时增大的效果。本发明的制造过程中使用的多元羧酸几乎不残留在最终干燥产品中，在将该干燥产品溶于水时不产生不溶物的原因以及在减压干燥时高分子量成分的经时生成或Mw经时增大的抑制效果的原因，虽然尚不明确，但事实上通过在制造过程中与多元羧酸接触可得到稳定的干燥产品且重现性良好、能够可靠地保证干燥产品的水溶解性。因此，本发明提供如下发明。

本发明是一种活性酯化多糖的制造方法，其中，使酸型多糖的羧基与亲电子性基团导入剂进行酯化反应而生成活性酯化多糖，使生成的活性酯化多糖与多元羧酸接触，然后使其析出并将其回收。

通常，对回收上述沉淀后得到的活性酯化多糖进行减压干燥。

另外，本发明提供由上述方法得到的活性酯化多糖。

根据本发明，起到对最终干燥工序中的目标化合物的分子量经时上升的抑制效果。即使以商业规模也可稳定地制造不产生不溶物的活性酯化多糖(干燥品)，可提供品质稳定的活性酯化多糖。

具体实施方式

以下，参照制造方法具体地说明本发明。

本说明书中，将具有羧基的多糖称为“酸型多糖”。

本发明中，使酸型多糖的羧基、与亲电子性基团导入剂进行酯化反应，生成活性酯化多糖，使生成的活性酯化多糖与多元羧酸接触，然后使活性酯化多糖析出并将其回收。