[发明专利]改进的LOV-D酰基转移酶介导的酰化作用

权利要求书

1.一种制备抑制素化合物的方法，所述方法包括在硫酯供体和选自硫醇清除剂、沉淀剂和其组合的试剂存在下，在产生抑制素化合物的条件下使LovD酰基转移酶底物与LovD酰基转移酶接触。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶底物是红曲菌素J。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述红曲菌素J是红曲菌素J羟酸盐。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述红曲菌素J是红曲菌素J内酯。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶底物是洛伐他汀。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述洛伐他汀是洛伐他汀羟酸盐。

7.根据权利要求5所述的方法，其中所述洛伐他汀是洛伐他汀内酯。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶底物是6-羟基-6-去甲基-红曲菌素-J。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述6-羟基-6-去甲基-红曲菌素J是6-羟基-6-去甲基-红曲菌素J羟酸盐。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述6-羟基-6-去甲基-红曲菌素J是6-羟基-6-去甲基-红曲菌素J内酯。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶底物是普伐他汀。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述普伐他汀是普伐他汀羟酸盐。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述普伐他汀是普伐他汀内酯。

14.根据权利要求1-13任一项所述的方法，其中所述硫酯供体是α-二甲基丁酰硫酯。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述α-二甲基丁酰硫酯选自由α-二甲基丁酰-S-巯基丙酸甲酯(DMB-S-MMP)、二甲基丁酰-S-巯基丙酸乙酯(DMB-S-EMP)、二甲基丁酰-S-巯基乙酸甲酯(DMB-S-MTG)、二甲基丁酰-S-巯基丁酸甲酯(DMB-S-MMB)、S-2-乙酰氨基乙基2，2-二甲基硫代丁酸酯、S-乙酰氨基甲基2，2-二甲基硫代丁酸酯和2-(2，2-二甲基硫代丁酰)乙酸甲酯组成的组。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述α-二甲基丁酰硫酯是DMB-S-MMP。

17.根据权利要求14所述的方法，所述方法在pH范围约pH 8至pH9.5的水性介质中进行。

18.根据权利要求14所述的方法，所述方法在具有约pH 9的初始pH的水性缓冲液中进行。

19.根据权利要求14所述的方法，其中所述试剂是硫醇清除剂。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述硫醇清除剂是活性炭。

21.根据权利要求14所述的方法，其中所述试剂是沉淀剂。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述沉淀剂是氢氧化铵。

23.根据权利要求14所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶是具有选自表2的氨基酸序列的LovD变体。

24.根据权利要求14所述的方法，其中所述LovD酰基转移酶是具有对应于SEQ ID NO：116的氨基酸序列的LovD变体。

25.一种制备斯伐他汀羟酸铵盐的方法，所述方法包括在α-二甲基丁酰硫酯供体和氢氧化铵存在下，在产生斯伐他汀羟酸铵盐的条件下使红曲菌素J或洛伐他汀与LovD酰基转移酶接触。

26.根据权利要求25所述的方法，所述方法在pH范围约pH 8至pH9.5的水溶液中进行。

27.根据权利要求25所述的方法，所述方法在具有约pH 9的初始pH的水性缓冲液中进行。