[发明专利]识别淀粉样蛋白β的转角结构的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及22位和23位的氨基酸具有转角结构的淀粉样蛋白β的测定方法、阿尔茨海默病的诊断方法和治疗方法。

背景技术

阿尔茨海默病(以下称“AD”)一般以老年斑中淀粉样蛋白的蓄积为特征。淀粉样蛋白主要由40以及42残基的淀粉样蛋白β蛋白质(以下分别称“Aβ40”以及“Aβ42”)构成。这些蛋白质是淀粉样蛋白前体蛋白质(APP)被β-以及γ-分泌酶这两种蛋白酶分解而生成的。可以认为：在AD的发病中，Aβ42因其凝集倾向、神经毒性而承担着比Aβ40更为重要的作用。最近的研究表明，氧化应激对与AD关联的神经变性做出贡献。自由基的形成介导的Aβ42的神经毒性与伴随活性氧种子的生成的10位的酪氨酸以及35位的甲硫氨酸的自由基化密切相关。另一方面，有证据显示，Aβ寡聚物的积累通过突触毒性诱导AD。

若对阿尔茨海默病模型小鼠接种Aβ凝集体作为疫苗，则减少脑内的Aβ沉积，抑制认知功能障碍，因而可以认为利用Aβ赋予免疫是有希望的AD治疗方法。但是，用Aβ42免疫AD患者的临床试验(AN1792)因过度的免疫活化这种严重的副作用而中止。作为该问题的理由之一，可以认为是无意识地除去了生理性Aβ42。因此，可以认为，对有效地抑制AD患者中淀粉样蛋白斑块的形成、认知功能障碍的进展而言，区分生理性Aβ42与有毒性的Aβ42是必须的。

通过组合应用系统脯氨酸取代法与固体NMR法的研究，将Aβ42的22位以及23位具有转角结构的毒性构象异构体与Aβ42的25位以及26位具有转角结构的生理构象异构体相区分(非专利文献1、专利文献1)。有报告称，前一种构象异构体显示强凝集能力和神经毒性。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：特开2006-265189

非专利文献

非专利文献1：K.Murakami等(2005)J.Am.Chem.Soc.，127：15168-15174

发明内容

本发明人等为了有效地识别Aβ的转角结构的差异、或提供仅以具有特定转角结构的Aβ作为靶标的治疗方法进行了试错试验。Aβ42的22位和23位具有转角结构的毒性构象异构体可逆性地转换为Aβ42的25位和26位具有转角结构的生理性构象异构体，其立体结构并不固定，因而使用野生型Aβ42制作特异性识别Aβ42的22位和23位具有转角结构的毒性构象异构体的抗体是困难的。因而，本发明人等为了解决上述结构的不稳定性引起的问题，尝试了通过将22位的谷氨酸取代成脯氨酸，使用该部位的转角结构固定的抗原来制作特异性识别Aβ42的22位和23位的氨基酸具有转角结构的毒性构象异构体的抗体。一般地，抗体严密地识别、区分氨基酸的差异，在使用在目的抗体识别的部位(22位以及23位)中导入氨基酸突变而成的突变体蛋白质(22位为脯氨酸的Aβ42)作为抗原的情况下，获得识别导入突变前的野生型蛋白质(22位为谷氨酸的Aβ42)的抗体是困难的。但是，本发明人等进行了仔细的筛选实验，结果从使用所述突变型抗原得到的抗体中发现了特异性识别野生型、且22位和23位的氨基酸具有转角结构的Aβ42的毒性构象异构体的抗体，从而完成了本发明。

即，本发明涉及特异性识别22位和23位的氨基酸具有转角结构的Aβ的毒性构象异构体的抗体及其利用，具体地涉及以下发明。

(1)特异性识别22位和23位的氨基酸具有转角结构的Aβ(以下称作“22-23转角Aβ”)的抗体。

(2)含有与22-23转角Aβ特异性结合的物质作为有效成分的药物组合物。

(3)(2)所述的药物组合物，其是阿尔茨海默病治疗药物。

(4)22-23转角Aβ的测定试剂盒，其具备与22-23转角Aβ特异性结合的物质。

(5)阿尔茨海默病的诊断试剂，其具备与22-23转角Aβ特异性结合的物质。

(6)被检物中的22-23转角Aβ水平的测定方法，其具备使被检物和与22-23转角Aβ特异性结合的物质相接触的工序。

(7)阿尔茨海默病的诊断方法，其具备检测被检物中的22-23转角Aβ的步骤。

(8)阿尔茨海默病的诊断方法，其具备以下步骤：

a)制备被测试者来源的试样的步骤；

b)使该试样与至少一种特异性识别22-23转角Aβ的抗体接触的步骤；

c)检测该抗体对22-23转角Aβ的结合，测定22-23转角Aβ的水平的步骤；以及