[发明专利]非交叉反应性抗IgG抗体

说明书

本发明报导了特异性结合人和黑猩猩IgG类抗体的IgG-Fab片段的恒定区的抗体及其在免疫测定中的用途。

发明背景

自从Koehler和Milstein在1974年开发了首例单克隆抗体以来，进行了许多努力以开发适用于治疗人的抗体。首例可获得的单克隆抗体已在小鼠和大鼠中被开发。在过去10年中，越来越多的人单克隆抗体或人源化单克隆抗体已进入市场。熟知的实例包括例如来自F.Hoffmann-La Roche AG，Basel的Herceptin和MabThera

极大量的人或人源化抗体正在调查研究中，并在能够考虑进入人体进行初步试验以前需要在实验动物中研究。必须研究如生物可用性和抗体清除等(只提到其中2种)的重要标准。许多这些研究需要在实验动物自身抗体的背景下定量治疗抗体。在大多数情况下使用哺乳动物作为实验动物。通常最先在啮齿类如小鼠或大鼠中评估毒理学。在更高级的药物开发阶段，特别是在药物进入人体以前，甚至必须将猴子包括在这样的临床前研究中。

哺乳动物循环中通常具有约10至约30毫克/ml之间的抗体。治疗单克隆抗体一般必须以范围从约1纳克/ml至约100毫克/ml之间的血清水平进行检测。因此，必须在实验动物抗体的背景下检测治疗抗体，所述实验动物抗体为约100倍至1千万倍过量。

在实验动物抗体的背景下检测人或人源化治疗抗体是对药理学家的极为严峻的任务。检测动物与智人的亲缘关系越近，人或人源化抗体的检测就变得越来越困难。

在WO 2008/031532中报导了一种抗药物抗体测定。在WO 2006/066912中报导了在实验动物中检测治疗抗体。在US 5,332,665中报导了物种特异性、高亲和力的单克隆抗体。

发明概述

本发明首先报导了在人和黑猩猩的G型免疫球蛋白的抗体上的构象表位，其不存在于通常使用的实验动物中。其次报导了与此表位结合的非交叉反应性抗人IgG抗体和抗黑猩猩IgG抗体。第三，报导了使用这些抗体的测定。

本发明报导的一个方面是结合人或黑猩猩IgG(G亚类的免疫球蛋白)但不结合犬和绒猴(marmoset)IgG的抗体。

在一个实施方案中，所述抗体不结合犬、恒河猴(Rhesus-monkey)、绒猴、狒狒和食蟹猴(cynomolgus)IgG。在另一个实施方案中，所述抗体特异性结合人和黑猩猩IgG。在另外的实施方案中，通过表面等离子共振测定的结合人或黑猩猩IgG的K_D值是10^-9mol/l或更低，结合犬、恒河猴、绒猴、狒狒和食蟹猴IgG的K_D值是10^-6mol/l或更高。在一个实施方案中，结合人或黑猩猩IgG的K_D值是10^-9mol/l至10^-13mol/l。在另一个实施方案中，结合犬、恒河猴、绒猴、狒狒和食蟹猴IgG的K_D值不能通过表面等离子共振测定。在一个实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。

本发明报导的另一个方面是特异性结合包含κ轻链恒定结构域的IgG1(G1亚类的免疫球蛋白)的抗体。

在一个实施方案中，所述抗体还结合IgG2。在另一个实施方案中，所述抗体还结合IgG4。在另一个实施方案中，所述抗体不结合IgG3。在一个实施方案中，所述抗体不结合包含λ轻链恒定结构域的IgG1。在一个实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。

本发明报导的从细胞系DSM ACC3006(M-1.3.2)，DSM ACC3007(M-1.5.8)和DSM ACC3008(M-1.7.10)得到的抗体与例如细胞系DSM ACC2708产生的抗体M-R10Z8E9比较时显示了降低的交叉反应性，它们结合Fab区中的不同表位，不受邻近的糖基化位点的影响，并可在免疫测定中混合用于测定Fab治疗抗体，因为每种抗体的结合位点在Fab片段中仅出现1次。

本发明报导的各方面是细胞系DSM ACC3006，DSM ACC3007和DSM ACC3008，以及从所述细胞系得到的各个抗体和这些抗体在免疫测定中的用途。

另一个方面是一种试剂盒，其包含

a)从DSM ACC3006，或DSM ACC3007，或DSM ACC3008，或DSM ACC2708得到的抗体的生物素化形式，