[发明专利]新型7-苯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3(2H)-酮衍生物

说明书

技术领域

本发明涉及p38丝裂原活化蛋白激酶的新型抑制剂。

背景技术

MAP(丝裂原活化蛋白)激酶是将膜信号翻译成基因表达应答的进化保守的酶。在哺乳动物中，可以分成4类丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)：细胞外信号相关的激酶(ERK1/2)，Jun氨基末端激酶(JNK1/2/3)，p38蛋白(α，β，γ和δ)和ERK5。由MAPK、MAPK激酶和MAPK激酶激酶组成的三级级联对这些蛋白质进行调节。

p38MAPK最初被识别为CSAID(细胞因子抑制消炎药)的靶点，其在引起TNF-α(肿瘤坏死因子-α)和其他细胞因子产生的信号转导通路中具有核心作用(Lee等，1984年)。在应激刺激和促炎刺激的应答中，通过MKK3、MKK4或MKK6使苏氨酸和酪氨酸磷酸化而激活p38(Kyriakis和Avruch，2001年)。接着，p38磷酸化其在丝氨酸和苏氨酸残基中的效应因子，即蛋白激酶磷酸酶和转录因子，如ATF-2、MEF2、MAPKAPK2、MSK1/2或MNK1/2。总括起来，该激活级联引起通过四种不同的机制对基因表达进行控制，这四种机制为：转录因子的激活；mRNA的稳定化；mRNA的翻译；以及染色质中的NF-kB结合位点处的组蛋白磷酸化(Shi和Gaestel，2002；Sacanni等，2001)。

有四种不同的通过不同的基因编码的p38亚型：p38α、p38β、p38γ和p38δ，每一种呈现出不同的组织表达谱。通过mRNA和蛋白水平评估，p38α和p38β得到了广泛表达，且p38β表达与中枢神经系统组织(脑、大脑皮质、小脑，海马体等)更加相关(Beardmore等，2005；Wang等，1997)。p38γ的表达在骨骼肌中更为突出，而p38δ主要定位在心脏、肾脏、肺和肾上腺。在细胞水平上，p38α和p38δ似乎是在免疫细胞(单核细胞，巨噬细胞，中性粒细胞和T细胞)中最相关的亚型(Hale等，1999)。特定的p38α/β抑制剂的药理抑制以及基因打靶的研究表明，p38α是最有可能通过其下游底物MAPKAP-K2调节炎症反应的亚型(Kotlyarov等，1999)。同样，这种亚型在早期胚胎发育中是必要的，因为p38α基因敲除(KO)的小鼠因胎盘发育不全和血管缺陷而在胚龄12.5天死亡(Allen等，2000；Tamura等，2000，Adams等，2000)，在MKK3/MKK6双基因敲除的小鼠中也再现了这样的表型(Brancho等，2003)。相反，p38β、p38γ和p38δ基因敲除的小鼠没有表现出任何发育缺陷(Beardmore等，2005；Sabio等，2005)。p38β基因敲除小鼠对促炎刺激(LPS)出现了与野生型对照相似的反应，表明该亚型在炎症中不产生作用(Beardmore等，2005年)。

已采用不同的化学系列的p38抑制剂，在体外和体内对p38MAPK通路对炎症的促成进行了研究(Pargellis和Regan，2003；Kumar等，2003)。最广泛使用的分子抑制剂SB203580实际是p38α/β的双抑制剂。抑制p38使TNF-α以及其他促炎细胞因子的释放得到抑制，所述其他促炎细胞因子如在外周单个核细胞(PBMC)、全血或人单核细胞株THP-1中的IL-1、IL-6和IL-8。

由于p38参与TNF-α生成，因此在TNF-α具有病理生理作用的疾病的动物模型中测试了p38的抑制剂。p38抑制剂降低了小鼠的胶原性关节炎和大鼠的佐剂性关节炎的严重程度(Pargellis和Regan，2003)。此外，p38抑制剂也改善了关节炎动物模型中的骨吸收，可能是由于p38MAPK参与造骨细胞的分化。p38抑制剂减轻了患有克罗恩病的小鼠模型中的炎症反应，且减少了在人类克罗恩病病人的活组织切片检查中的TNF-α的产生(Hollenbach等，2005；Waetzig等，2002)。由于中性粒细胞专用p38通路，则p38也被认为是慢性阻塞性肺病(COPD)的靶点(Nick等，2002年)。p38抑制剂降低了肺中的中性粒细胞增多、炎性细胞因子、MMP-9和纤维变性(Underwood等，2000)。在受照射的皮肤模型中，抑制p38通过阻止细胞凋亡和炎症反应来保护表皮以免受强烈紫外线辐照而损伤(Hildesheim等，2004)。抑制p38还逆转了源自骨髓增生异常综合征(其中TNF-α过度产生具有病理生理作用)的病人的骨髓中的造血缺陷(Katsoulidis等，2005)。