[发明专利]蛋白酶变体的用途

说明书

涉及序列表

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技术领域

本发明涉及新型枯草杆菌酶(subtilase)变体的用途，其相对于亲本枯草杆菌酶在一个或多个性质中呈现改变，所述性质包括：洗涤性能，热稳定性，储藏稳定性或催化活性。本发明的变体特别适用于例如清洁硬表面如洗碟。因此，本发明还涉及包含本发明变体的清洁和洗碟组合物，包括自动洗碟组合物。本发明还涉及本发明的组合物用于去除蛋白性污迹，特别是煮蛋污迹的用途。

背景技术

在去污剂工业中，酶应用于在洗涤制剂中已超过30年。用于此类制剂的酶包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、甘露糖苷酶以及其他酶，或其混合物。商业上，最重要的酶是蛋白酶。

越来越多数量的商业上使用的蛋白酶是天然出现的野生型蛋白酶的蛋白质工程变体，例如DURAZYM(R)、RELASE(R)和(Novozymes A/S)、AXAPEM(R)(Gist-Brocades N.V.)、PURAFECT(R)(Genencor International、Inc.)、MAXATASE^TM、MAXACAL^TM、MAXAPEM^TM、PROPERASE^TM、PURAFECT^TM、PURAFECT OxP^TM、FN2^TM、FN3^TM和FN4^TM(Genencor International、Inc.)。

此外，本领域中描述了许多变体，如WO 04/041979(NOVOZYMES A/S)中描述了相对于亲本枯草杆菌酶在例如洗涤性能、热稳定性、储藏稳定性或催化活性中呈现改变的枯草杆菌酶变体。所述变体适用于例如清洁或去污剂组合物。

已描述了许多有用的蛋白酶变体，其中许多在不同去污剂中具有改善的活性、稳定性和溶解性。然而，多种因素使得蛋白酶的进一步改善是有利的。

在洗碟中，一种特别的问题是去除蛋白性污物，如蛋污迹，且已进行了数种尝试提供对此种污迹有效的蛋白酶或蛋白酶变体。

因此本发明的一个目标是提供与其亲本酶相比具有改善的性能的枯草杆菌蛋白酶(subtilinsin)的变体。

发明内容

本发明涉及亲本枯草杆菌蛋白酶的变体的用途，所述亲本可为如示于SEQ ID NO:1的枯草杆菌蛋白酶。本发明的变体与亲本枯草杆菌蛋白酶相比具有至少一种改善的性质，所述亲本可为如示于SEQ ID NO:1的枯草杆菌蛋白酶。具体而言，本发明的变体在硬表面洗涤如洗碟洗涤中具有改善的洗涤性能，在本发明的一个方面，所述变体具有改善的蛋去除能力，如改善的从硬表面去除煮蛋(boiled egg)的能力。

因此，本发明的一个方面涉及枯草杆菌蛋白酶变体在硬表面清洁中的用途，其中所述变体包含亲本枯草杆菌蛋白酶的取代9R、15T、68A、245R和218{D,G，V}，且其中所述位置对应于SEQ ID NO:2[BPN’]的成熟多肽的位置。

在一个具体实施方案中，在位置218的取代为用D的取代。

另一个实施方案涉及变体在硬表面清洁中的用途，所述变体进一步包含至少一种下述修饰：G61{D,E}，N62{D,E}，N76{D,E}；*97aG，A98{G，S}，S99G，S101G，H120{N,Q,V，D}，P131{T，S}，Q137H，A194P，A228V，A230V，N261D。

一个具体实施方案涉及变体在硬表面清洁中的用途，所述变体包含下述取代：S9R、A15T、V68A、N218D和Q245R。

在一个进一步的实施方案中，所述变体进一步包括一种或多种下述取代：G61E、A98S和S99G。

因此，一个具体实施方案涉及变体在硬表面清洁中的用途，所述变体包含下述取代：S9R、A15T、G61E、V68A、A98S、S99G、N218D和Q245R。

在另一个实施方案中，所述亲本枯草杆菌蛋白酶是包含与SEQ ID NO:1具有至少80%同一性的氨基酸序列的多肽。

一个进一步的实施方案涉及变体在硬表面清洁中的用途，所述变体具有与SEQ ID NO:3具有至少80%同一性的多肽序列。

一个进一步的实施方案涉及变体在硬表面清洁中的用途，所述变体具有与SEQ ID NO:4具有至少80%同一性的多肽序列。