[发明专利]具有葡糖淀粉酶活性的多肽及其编码多核苷酸

说明书

本发明涉及具有葡糖淀粉酶活性的分离的多肽和编码所述多肽的分离的多核苷酸。本发明还涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生和使用所述多肽的方法。

涉及序列表

本申请涉及计算机可读形式的序列表，其通过提述并入本文。

涉及生物材料的保藏

本申请包含对于生物材料保藏的引用，所述保藏通过提述并入本文。关于完整信息参见说明书最后一段。

发明背景

技术领域

本发明涉及具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞以及用于产生和使用所述多肽的方法，并涉及本发明的葡糖淀粉酶在转化淀粉以产生发酵产物如乙醇和糖浆如葡萄糖中的用途。本发明还涉及包含本发明的葡糖淀粉酶的组合物。

背景技术

葡糖淀粉酶(1,4-α-D-葡聚糖葡糖水解酶，EC 3.2.1.3)是一种催化D-葡萄糖从淀粉或相关的寡糖和多糖分子的非还原端释放的酶。葡糖淀粉酶由数种丝状真菌和酵母产生，其中来自曲霉属(Aspergillus)的那些在商业上最为重要。

商业上，使用葡糖淀粉酶将已经由部分α-淀粉酶部分水解的淀粉材料转化为葡萄糖。然后可使用发酵生物将葡萄糖直接或间接转化为发酵产物。商业性发酵产物的实例包括醇(例如，乙醇、甲醇、丁醇、1,3-丙二醇)；有机酸(例如柠檬酸、乙酸、衣康酸、乳酸、葡糖酸、葡糖酸盐、乳酸、琥珀酸、2,5-二酮-D-葡糖酸)；酮(例如丙酮)；氨基酸(例如谷氨酸)；气体(例如H₂和CO₂)和更复杂的化合物，包括例如抗生素(例如青霉素和四环素)；酶；维生素(例如核黄素，B₁₂，β-胡萝卜素)；激素，和其他难以合成产生的化合物。发酵工艺亦常用于可饮用的醇类(例如啤酒和葡萄酒)，乳类产品(例如，酸奶和奶酪的产生)工业。

终产物亦可为糖浆。举例而言，终产物可为葡萄糖，但亦可例如通过葡糖异构酶转化为果糖或基本上由等量葡萄糖和果糖构成的混合物。该混合物，或进一步富集果糖的混合物，是在全世界得到商业化的最常用的高果糖玉米糖浆(HFCS)。

本发明的目的是提供具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸，且其在发酵产物产生工艺如醇产生工艺中提供高收率，包括从未糊化的生(或未烹制)淀粉的一步乙醇发酵工艺。

Uniprot:B0CVJ1公开了来自双色蜡蘑(Laccaria bicolor)的多肽，而WO2006/069289描述了来自瓣环栓菌(Trametes cingulata)的葡糖淀粉酶。

发明内容

鉴定并表征了由真菌粘褶菌属(Gloeophyllum)产生，并具有葡糖淀粉酶活性的多肽。更具体而言，所述粘褶菌属菌种选自下组：冷杉粘褶菌(G.abietinum)、篱边粘褶菌(G.sepiarium)和密粘褶菌(G. trabeum)。