[发明专利]检测属于肺炎支原体和/或生殖支原体的微生物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及以对于微生物的检测具有特异性的分子作为指标的、该微生物的检测方法，以及该微生物的检测用试剂盒，所述微生物属于作为一般的肺炎的原因微生物的肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae）和/或生殖支原体（Mycoplasma genitalium）。

背景技术

（1）肺炎支原体肺炎的患者比例和症状

肺炎支原体感染病归类为社区获得性非典型肺炎，其在社区获得性肺炎中所占比例是成人30～40%，限于15～25岁的年轻成人则波及60～70%。肺炎支原体的感染途径是经呼吸道感染，在学校等机构、家族内感染扩大的情况也不少。另外，在肺炎支原体感染病中，肺炎发生为感染病的约3～5%，其余成为支气管炎、上呼吸道炎、隐性感染。特征性症状是从感染初期起不伴咳痰的顽固性咳嗽，有时也伴有发热、头痛、咽痛、恶寒、全身倦怠等症状。

（2）肺炎支原体感染病的检查现状

肺炎支原体感染病的检查一般为来自患者咽拭子的培养检查、应用患者血清的抗体检查。对于培养检查，肺炎支原体自身仅在特殊的培养基中发育、操作困难、在最终肺炎支原体的鉴定中需要实施PCR检查，因此目前的情况是只能在限定的设施中检查，另外，由于培养需要数周，因此需要迅速得到结果的检查。

另一方面，抗体检查与一般的培养检查相比操作容易且迅速得到结果，因此是常常应用的检查，但由于支原体的IgM抗体效价具有持续性，成问题的是，难以判断是以前的感染还是本次的感染、至抗体效价升高花费时间。为了解决这些问题，提议根据感染急性期和恢复期的随时间的抗体效价升高进行判断，但是，至恢复期进行抗体检查非常花费时间，因此治疗延迟，对患者造成症状的拖延、恶化，并且进一步地，可能产生继发感染引起的感染扩大的不利影响。

另外，为了解决上述问题，公开了用于诊断肺炎支原体感染病的、特异性地检测属于肺炎支原体的微生物的有用抗体，以及检测方法。

例如，专利文献1记载了应用针对约43千道尔顿（KDa）的肺炎支原体的膜抗原蛋白质的单克隆抗体的免疫检测法。另外，专利文献2记载了应用针对核糖体蛋白质L7/L12的抗体，可以准确性良好地进行肺炎支原体的检测。另外，专利文献3记载了通过针对肺炎支原体的P1蛋白质的单克隆抗体（其仅显示与支原体属的其它种或共存菌群的其它病原种1%或更低的交差反应性），可以进行肺炎支原体感染的迅速且特异的诊断。

但是，对于上述抗体以及应用该抗体的检测法，为了检测临床样本中属于肺炎支原体的微生物，有时也需要对含有该微生物的样本进行复杂的预处理，另外，具有对于特异性、灵敏度低的肺炎支原体的特异性诊断不充分的问题。

（3）生殖支原体和疾病

非淋菌性尿道炎的主要病因菌已知沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis）。但是，在非淋菌性尿道炎患者中，检测出沙眼衣原体的为30～40%左右，多数其症状的来源不明。除了沙眼衣原体，关注支原体属以及脲原体属的微生物，特别地，生殖支原体显示为非淋菌性尿道炎以及性行为感染病的病因菌中的一种。

（4）生殖支原体感染病的检查现状

对于生殖支原体感染病，论文中有利用培养法、PCR法的报告实例，但由于这些方法不能进行迅速的诊断，需要迅速且特异性地检测临床样本中属于生殖支原体的微生物的方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开昭63-298号公报

专利文献2：国际公开WO2001/057199号小册子

专利文献3：日本特开平5-304990号公报。

发明内容

根据以前的方法，不能迅速且特异性地检测属于肺炎支原体和/或生殖支原体的微生物。因此目前的情况是，无法迅速地诊断肺炎支原体和/或生殖支原体感染病，治疗延迟，对患者造成症状的拖延、恶化，并且进一步地，可能产生继发感染引起的感染扩大的不利影响。如果能够迅速地检测、诊断对这些支原体的感染，则施用对支原体有效的大环内酯类抗生素成为可能，可以在感染初期开始准确的治疗。

另一方面，已知肺炎支原体和生殖支原体在血清学上非常相近，但如上述，由于肺炎支原体和生殖支原体的感染部位（组织、器官等）不同，认为如果可以鉴定可特异性地检测两种微生物的分子，则可以以该分子为指标诊断两种感染病。

本发明鉴于上述问题作出，其目的是提供：鉴定用于迅速且特异性地诊断肺炎支原体和/或生殖支原体感染病的分子、并以该分子为指标的检测方法，以及检测试剂盒。