[发明专利]布鲁氏菌噬菌体多核苷酸及其用途

说明书

技术领域

本发明在其一些实施方式中涉及布鲁氏菌（Brucella）噬菌体核酸序列及其用途。

背景技术

布鲁氏菌（布鲁氏菌属，Brucella）是革兰氏阴性的小球杆菌属细菌。它们是导致天然宿主在怀孕的最后阶段流产的动物病原体。布鲁氏菌属包括10个物种，这10个物种分为带有光滑和粗糙外膜LPS的生物。分别与小反刍动物、牛和猪的布鲁氏菌病相关的三个光滑型布鲁氏菌物种（马尔他布鲁杆菌（羊布鲁氏菌，B.melitensis）、流产布鲁氏菌（流产布鲁杆菌，B.abortus）和猪布鲁氏菌（猪布鲁杆菌，B.suis））是人畜共患病的（zoonotic to humans）。将与海洋哺乳动物布鲁氏菌病相关的鲸型布鲁氏菌（B.ceti）和鳍型布鲁氏菌（B.pinnipedialis）记载为人布鲁氏菌病的致病物（致病因素）的报告不常见。另外，与犬布鲁氏菌病相关的犬布鲁氏菌（B.canis）是导致人感染的粗糙型生物。该疾病在人中表现为波状热，也称为马尔他发热，且它可能是由脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎和其他并发症的慢性疾病或表现造成的。在极少数情况下该疾病可能变成致命的。

布鲁氏菌噬菌体是对布鲁氏菌物种有特异性的细菌病毒。布鲁氏菌噬菌体和它们的分类学关联性的综述出版于1981年。所有同时期已知的布鲁氏菌噬菌体显示包含属于短尾病毒科（Podoviradae）的相似的二十面体头和短尾形态。根据抗原和生理特性以及对化学试剂和物理试剂的抗性，显示所研究的噬菌体密切相关。这些研究结果激发作者将所概述的变体包括到单个物种中并提出噬菌体Tb为病毒类型（Ackerman,H.-W.,Simon,F.,和Verger,J.-M.1981.Intervirology 16:1-7）。

布鲁氏菌噬菌体具有大小为约38千个碱基对的线性双链DNA。噬菌体Tb、Fi、Wb、Iz和R/C的限制酶消化分析在DNA上表现出相似性，而且几乎没有发现噬菌体的溶源性存在或者宿主中存在质粒形式的证据。

先前的研究已确定鸟嘌呤核苷-胞嘧啶在噬菌体Tb中的含量为45.3-46.7%，而预期它在其他噬菌体中具有更高的百分比，为48.9%。

数位研究者已指出噬菌体作为病原性疾病治疗药剂的用途（Brüssow,H.2005.Microbiol.151:2133–2140;Summers,W.C.2001.Ann.Rev.Microbiol.55:437-451）。

另外，布鲁氏菌噬菌体已用于布鲁氏菌分型，且噬菌体敏感性试验已变成分类和确定布鲁氏菌属的分类树的工具。具体地，有人建议布鲁氏菌属的分类品种（nomen-species）的划分部分地根据它们的物种特异性噬菌体敏感性判断，该物种特异性噬菌体敏感性也与菌株的宿主从属关系（亲和，affiliation）具有良好的相关性。布鲁氏菌噬菌体已根据它们对布鲁氏菌属某些种（Brucella spp）的感染性分成7组。噬菌体Izatnagar（Iz₁）代表对所有光滑型布鲁氏菌分类品种（nomenspecies）和部分粗糙型菌株有感染性的组6（Corbel和Tolari,1988,Res Vet Sci;44:45-49）。

Zhu等人,2009[Int.J.Mol.Sci.10:2999–3011]教导了Tb（Tbilisi，第比利斯）布鲁氏菌噬菌体的部分序列。

Rigby等人,1989[Can J Vet Res.53:319-325]教导了Nepean噬菌体和布鲁氏菌物种的其他裂解性噬菌体的部分序列。

美国专利No.20030017449教导了利用布鲁氏菌噬菌体检测布鲁氏菌的方法。

发明内容

根据本发明一些实施方式的一个方面，提供了包含布鲁氏菌噬菌体核酸序列的分离多核苷酸，该核酸序列对布鲁氏菌噬菌体有特异性并包含选自由SEQ ID NO:396和387-393组成的组中的序列。

根据本发明一些实施方式的一个方面，提供了与本发明分离多核苷酸杂交的长度为至少15个核苷酸的分离多核苷酸。