[发明专利]纯化糖蛋白的方法

权利要求书

1.纯化糖蛋白的方法，包括对含有所述糖蛋白的液体进行下述步骤：

a)反相色谱法，

b)尺寸排阻色谱法，和

c)疏水相互作用色谱法。

2.根据权利要求1的方法，其中所述步骤以下述顺序进行

(1)反相色谱法，

(2)尺寸排阻色谱法，和

(3)疏水相互作用色谱法。

3.根据权利要求1或2的方法，其中在反相色谱法步骤a)中洗脱缓冲剂含有有机溶剂，优选异丙醇。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中在尺寸排阻色谱法步骤b)中进行缓冲剂交换。

5.根据权利要求1至4中任一项的方法，额外地包含选自色谱法步骤、过滤步骤和病毒灭活步骤的一个或多个步骤。

6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其中所述额外步骤选自离子交换色谱法、亲和色谱法、透析过滤、超滤、纳米过滤和病毒灭活。

7.根据权利要求1至6中任一项的方法，额外地包含阴离子交换色谱法步骤d)。

8.根据权利要求7的方法，其中在尺寸排阻色谱法步骤b)之后进行阴离子交换色谱法步骤d)。

9.根据权利要求7或8的方法，其中在阴离子交换色谱法步骤d)中使用含有至少一种盐的洗脱缓冲剂。

10.根据权利要求7至9中任一项的方法，其中所述糖蛋白的不同带电同种型得以分离。

11.根据权利要求1至10中任一项的方法，其中所述糖蛋白选自FSH、CG、LH和TSH，优选FSH。

12.根据权利要求1至11中任一项的方法，其中所述糖蛋白重组地产生。

13.根据权利要求1至12中任一项的方法，包括按顺序进行下述步骤

(0)超滤：

(1)反相色谱法；

(1a)任选地超滤；

(2)尺寸排阻色谱法；

(3)阴离子交换色谱法；

(4)疏水相互作用色谱法；

(5)超滤和/或透析过滤；

(6)纳米过滤。

14.制备目的糖蛋白的方法，包括下述步骤：

i)重组地表达目的糖蛋白；

ii)通过对含有所述糖蛋白的液体进行至少下述步骤，纯化所述重组地表达的目的糖蛋白：

a)反相色谱法，

b)尺寸排阻色谱法，和

c)疏水相互作用色谱法。

15.根据权利要求14的制备方法，包括下述步骤中的至少一个：

i)如权利要求1至13中所定义的一个或多个步骤；和/或

ii)将目的糖蛋白配制为药物配制剂形式的步骤。

16.根据权利要求14或15的制备方法，其中所述糖蛋白选自促性腺激素，优选选自FSH、CG、LH和TSH。