[发明专利]靶向参与脂肪酸生物合成的植物基因的工程改造锌指蛋白

权利要求书

1.一种调控至少一种内源植物基因表达的非天然存在的锌指蛋白，其特征在于，所述至少一种植物基因涉及脂肪酸生物合成并选自下组：β-酮酰基-ACP合成酶(KAS)基因、脂肪酸硫酯酶B(FatB)基因、脂肪酸合成酶(FAS)基因、脂肪酸延伸酶基因、脂肪酸硫酯酶A(FatA)基因、质体G-3-P脱氢酶(GPDH)基因、甘油激酶(GK)基因、硬脂酰-乙酰载体蛋白去饱和酶(S-ACP-DES)基因、和油酰-ACP水解酶基因。

2.一种融合蛋白，其特征在于，所述蛋白包括权利要求1所述的锌指蛋白和功能结构域。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述功能结构域是转录调节结构域或切割结构域。

4.如权利要求1-3中任一所述的锌指蛋白或融合蛋白，其特征在于所述植物基因包含在芸苔属植物中。

5.如权利要求4所述的锌指蛋白，其特征在于，所述锌指蛋白结合如表2或表10A所示的靶位。

6.如权利要求4所述的锌指蛋白，其特征在于，所述锌指蛋白包括表1或表10B的行中所示的识别螺旋区域。

7.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1-6中任一项所述的一种或多种锌指蛋白或融合蛋白。

8.一种修饰参与植物细胞脂肪酸生物合成的一种或多种基因的方法，所述方法包括：

在所述一种或多种锌指蛋白表达且所述一种或多种基因修饰的条件下，将含如权利要求7所述的至少一种多核苷酸的一种或多种表达载体导入所述植物细胞。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述修饰包括调控至少一种基因的表达。

10.如权利要求9所述的方法,其特征在于，所述至少一种基因的表达被活化。

11.如权利要求9或10所述的方法,其特征在于，所述至少一种基因的表达被抑制。

12.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述多核苷酸编码锌指核酸酶且至少一种基因被切割。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将供体核酸导入从而所述供体载体通过同源重组导入切割位置的步骤。

14.一种植物细胞，所述植物细胞包括用权利要求8-13中任一所述的任何方法修饰的至少一种基因。

15.如权利要求14所述的植物细胞，其特征在于，所述细胞在种子中且所述种子中的脂肪酸成分被改良。

16.一种植物，所述植物包含如权利要求14-15中任一所述的至少一种细胞。

17.如权利要求16所述的植物的种子或后代。

18.一种植物，所述植物包括含权利要求1-6所述的锌指蛋白或权利要求7所述的多核苷酸的至少一种细胞。

19.如权利要求18所述的植物的种子或后代。