[发明专利]用于检测对治疗性抗IgE抗体特异性的抗体的测定法及其在过敏反应中的用途

权利要求书

1.一种用于检测样品中结合治疗性抗IgE抗体的属于IgE同种型的抗药物抗体的方法，包括下述步骤：

(a)使可能含有该抗药物抗体的样品与相对于该治疗性抗IgE抗体包含至少一处氨基酸突变的突变型治疗性抗体接触，其中该突变型治疗性抗体对人IgE的相对结合亲和力是该治疗性抗IgE抗体对所述人IgE的相对结合亲和力的约10%或更少；并

(b)检测该抗药物抗体对该突变型治疗性抗体的结合。

2.权利要求1的方法，其中该突变型治疗性抗体对人IgE的相对结合亲和力是该治疗性抗IgE抗体对人IgE的相对结合亲和力的约5%或更少。

3.权利要求1或2的方法，其中该突变型治疗性抗体对人IgE的相对结合亲和力是该治疗性抗IgE抗体对人IgE的相对结合亲和力的约2.5%或更少。

4.权利要求1-3任一项的方法，其中该突变型治疗性抗体对人IgE的相对结合亲和力是该治疗性抗IgE抗体对人IgE的相对结合亲和力的约1%或更少。

5.权利要求1-4任一项的方法，其中通过比较在ELISA测定法中对人IgE的结合来测量相对结合亲和力。

6.一种用于检测样品中结合治疗性抗IgE抗体的属于IgE同种型的抗药物抗体的方法，包括下述步骤：

(a)使可能含有该抗药物抗体的样品与相对于该治疗性抗IgE抗体包含至少一处氨基酸突变的突变型治疗性抗体接触，其中该突变型治疗性抗体对人IgE的效力是该治疗性抗IgE抗体对所述人IgE的效力的约10%或更少；并(b)检测该抗药物抗体对该突变型治疗性抗体的结合。

7.权利要求1-6任一项的方法，其中该突变型治疗性抗体包含该治疗性抗IgE抗体重和/或轻链CDR序列中的一处、两处、三处、四处、五处、或六处氨基酸突变。

8.权利要求1-7任一项的方法，其中该治疗性抗IgE抗体为omalizumab，且该突变型治疗性抗体包含轻链第一CDR中的一处、两处、或三处氨基酸突变。

9.权利要求8的方法，其中该突变型治疗性抗体包含重链氨基酸序列SEQID NO：2和轻链氨基酸序列SEQ ID NO：1，其中轻链中第30位、第32位、和第34位处的氨基酸Asp被替代。

10.权利要求9的方法，其中该突变型治疗性抗体包含重链氨基酸序列SEQID NO：2和轻链氨基酸序列SEQ ID NO：1及第30位、第32位、和第34位处氨基酸Asp变成Ala的替代。

11.权利要求1-10任一项的方法，其中该突变型治疗性抗体被捕捉至表面。

12.权利要求11的方法，其中该突变型治疗性抗体被直接固定化至该表面。

13.权利要求11的方法，其中该突变型治疗性抗体是经过标记的且经由特异性结合标记物的捕捉剂被捕捉至表面，其中该捕捉剂被固定化至表面。

14.权利要求13的方法，其中该标记物为生物素且该捕捉剂为链霉亲合素。

15.权利要求13的方法，其中该标记物为洋地黄毒苷且该捕捉剂为抗洋地黄毒苷抗体。

16.权利要求1-15任一项的方法，其中使该样品与被捕捉至表面的该突变型治疗性抗体接触。

17.权利要求1-15任一项的方法，其中在该突变型治疗性抗体被捕捉至表面之前使该样品与该突变型治疗性抗体接触。

18.权利要求1-17任一项的方法，其中用检测剂来检测该抗药物抗体对该突变型治疗性抗体的结合。

19.权利要求18的方法，其中该检测剂为结合人IgE Fc区的FcεRIα多肽。

20.权利要求19的方法，其中该FcεRIα多肽包含FcεRIα亚基胞外域。

21.权利要求20的方法，其中该FcεRIα多肽包含与IgG恒定区融合的FcεRIα亚基胞外域。

22.权利要求19-21任一项的方法，其中该FcεRIα多肽是经过标记的。