[发明专利]诱导型启动子在甲硫氨酸生产中的用途有效
申请号: | 201080063823.9 | 申请日: | 2010-12-13 |
公开(公告)号: | CN102762736A | 公开(公告)日: | 2012-10-31 |
发明(设计)人: | R.菲格;P.瓦索尔 | 申请(专利权)人: | 代谢探索者公司 |
主分类号: | C12P13/12 | 分类号: | C12P13/12 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 法国圣*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱导 启动子 甲硫氨酸 生产 中的 用途 | ||
1.一种用于在发酵工艺中生产甲硫氨酸、其前体或衍生物的方法,其包括如下步骤:
-在包含碳源、硫源和氮源的合适培养基中培养经修饰的微生物,和
-从所述培养基中回收甲硫氨酸和/或其衍生物,
其中在所述经修饰的微生物中,涉及甲硫氨酸生产的至少一种基因的表达在异源诱导型启动子的直接或间接控制下。
2.权利要求1的方法,其中所述涉及甲硫氨酸生产的至少一种基因的表达在异源诱导型启动子的直接控制下。
3.权利要求2的方法,其中所述诱导型启动子通过物理或化学刺激诱导。
4.权利要求3的方法,其中所述诱导型启动子通过物理刺激诱导,所述诱导型启动子选自由温度诱导型启动子或光诱导型启动子组成的组。
5.权利要求4的方法,其中所述温度诱导型启动子选自由通过噬菌体λ经修饰的阻遏物调节的启动子、启动子PR或PR的衍生物、启动子PL或PL的衍生物、和通过温度敏感的Lac阻遏物调节的经修饰的lac启动子组成的组。
6.权利要求5的方法,其中所述噬菌体λ经修饰的阻遏物是λ阻遏物等位基因cI857或λ阻遏物cI的任何其他温度不稳定的等位基因。
7.权利要求5或6的方法,其中在所述经修饰的微生物中,基因recA是缺失的。
8.权利要求3的方法,其中所述诱导型启动子通过化学刺激诱导,所述刺激选自由下述组成的组:
-碳分解代谢产物的阻遏中的变化;
-特定碳源的存在,或
-糖醇的存在。
9.权利要求1的方法,其中涉及甲硫氨酸生产的至少一种基因在异源诱导型启动子的间接控制下,所述基因由其表达在诱导型启动子控制下的异源RNA聚合酶转录。
10.权利要求9的方法,其中所述异源RNA聚合酶选自由T7和T3聚合酶组成的组。
11.权利要求1–10中任一项的方法,其中其表达在异源启动子的直接或间接控制下的所述至少一种基因选自由下述组成的组:cysK、cysZ、cysN、cysD、cysC、cysZ、sbp、ppc、pps、pyc、acs、metA、metB、metC、metE、metF、metH、metK、metL、asd、aspC、lysC、pykA、pykF、purU、操纵子cysPUWAM、cysJIH和gcvTHP、serA、serB、serC、lpd、glyA、ackA、pta、aceE、aceF、lpd、sucC、sucD、pck、maeB、poxB、ilvB、ilvN、ilvG、ilvM、ilvI、ilvH、aroF、aroG、aroH、thrB、thrC、sdaA、sdaB、sped、speC、astA、dapA、mdh、mqo、gltA、aceE、aceF。
12.权利要求1–11中任一项的方法,其中至少一种基因:thrA、cysE、metA的表达在异源诱导型启动子的直接或间接控制下。
13.权利要求12的方法,其中所述基因thrA、cysE和metA在异源诱导型启动子的直接或间接控制下。
14.一种经修饰用于甲硫氨酸的改善生产的微生物,其中在所述经修饰的微生物中,涉及甲硫氨酸生产的至少一种基因的表达在异源诱导型启动子的直接或间接控制下。
15.权利要求14的微生物,其包含权利要求2–13中描述的至少一种修饰。
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