[发明专利]一株温度耐受性酿酒酵母及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株温度耐受性酿酒酵母及其应用。

背景技术

酵母属于简单的单细胞真核生物，易于培养，且生长迅速，被广泛用于生产和现代生物学研究。酵母是世界上研究最多的微生物之一，是当今生物技术产品研发的热点和现代生物技术发展以及基因组研究的模式系统。

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是发酵工业中最常用的种类，其温度耐受性在28℃-35℃。在发酵的过程中，由于各种生化反应的不断进行，导致整个发酵体系的温度不断升高，从而严重影响酵母细胞的正常生长与代谢，甚至引起酵母的大量死亡。所以在实际生产过程中不得不采取各种方法对发酵体系进行降温，以保证发酵过程的正常进行；这是一种较大的物力和财力耗费。同时，耐高温酵母在饲料、酒精和面包的生产中也有广泛的需求。因此，获得耐高温酵母已成为当前国内外工业发酵行业研究的热点，备受广泛的重视。

发明内容

本发明的目的是提供一株温度耐受性酿酒酵母及其应用。

本发明提供的酿酒酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SBT1373，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC №.4378。

本发明所提供的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SBT1373为诱变得到，已于2010年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC №.4378。

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SBT1373在生产饲料、酒精或面包中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明还提供的获得耐47℃高温酿酒酵母的方法，包括如下步骤：用酵母膏胨葡萄糖(Yeast extract Peptone Dextrose，YPD)液体培养基在28℃活化酵母至对数生长期前期，再以1％(体积比)的比例转接至YPD液体培养基中，在28℃培养至OD₅₆₀值为0.6-1.5。吸取5mL的菌液于90mm培养皿中，置于紫外灯下进行诱变。条件为：紫外灯功率15W，距离30cm，时间10-50s。诱变后在4000rpm离心10min富集菌液，涂布于YPD固体培养基上，于45℃-50℃高温下筛选。紫外诱变后的菌株在可见光下会有光复活现象，因此所有操作必需在红光下进行。

上述酵母可以是购自中国工业微生物菌种保藏中心，编号为1373的酿酒酵母。

上述获得耐高温酿酒酵母的方法中，效果最佳的一种方法如下：所述的培养基为YPD液体培养基，活化转接后的菌液OD₅₆₀为1.2，紫外诱变时间为18s。

该方法选取合适浓度的菌液，即处于对数生长期前期的菌液，此时菌液浓度适中，能保证在所述条件下获得较高的突变频率，同时菌株生命力旺盛，新陈代谢比较活跃，对紫外线敏感，最易于发生基因突变而得到所需的突变株。基础耐温性能的测定是为了对比所得到的突变株在温度的耐受性上得到真正的提高。

本专利的耐高温酵母克服了普通酿酒酵母不能在高温下正常发酵的难点，具有47℃耐受性。因此，本专利所获得的耐高温酵母具有重要的经济和应用推广价值，在发酵工业中如饲料、酒精或面包的生产中具有很重要的应用价值。在生产上的优势主要表现为：①具有较高的发酵能力，即能快速并完全将糖分转化成乙醇，能够解决糖化温度和发酵温度不协调的矛盾，实现真正意义上的糖化发酵同步进行；从而减少葡萄糖对纤维素酶的抑制作用，提高纤维素酶的糖化率，进而提高纤维素发酵生产燃料乙醇的得率；②繁殖速度快，即具有高的生长速率。高温发酵还能够提高发酵效率，降低发酵时的冷却成本；③具有高的耐酒精能力，即对本身代谢产物的稳定性高，因而可以进行浓醪发酵；④抗杂菌能力强，即对杂菌代谢产物的稳定性高；⑤对培养基的适应性强，耐温、耐盐和耐干物质浓度的性能强。因此，使用耐高温酵母不仅有利于降低生产成本，充分利用现有设备，缩短生产周期，提高生产率，而且保证了夏季的正常生产。

附图说明

图1为1373的生长曲线；

图2为1373在紫外照射下的致死曲线。

具体实施方式

实施例1、本发明酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SBT1373的获得及鉴定

一、酿酒酵母生长曲线的测定