[发明专利]一种可溶性植物叶蛋白的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物蛋白提取领域，具体涉及一种可溶性植物叶蛋白的提取方法。

背景技术

人工提取获得的叶蛋白为可溶性蛋白，包括叶绿体基质蛋白、细胞质蛋白和可溶性部分的线粒体蛋白。组成植物叶片蛋白的另外一类蛋白是不可溶的固态蛋白，存在于榨汁后分离的绿色沉淀物中，包括不可溶的线粒体与叶绿体构造蛋白、细胞壁蛋白和核蛋白。在提取叶蛋白的过程中，植物原料经过匀浆、研磨和压榨等机械破碎后离心，弃掉不可溶的固态蛋白与残渣，从上清液中获得絮凝的叶蛋白。因此叶蛋白在提取液中的溶解程度直接影响到叶蛋白的提取率和最终产量。目前在提取叶蛋白的过程中对提高可溶性蛋白含量的研究主要集中在利用蛋白质等电点的性质，方法主要是溶剂浸提法和酸碱度法。这些现有技术工艺较为复杂、能源消耗高、由于加入酸、碱或有机溶剂等，对制得的叶蛋白和环境均造成不同程度的污染。

在传统工艺上，欲分离纯化植物组织中的蛋白质必须利用溶解度的差异 (如盐析、有机溶剂分级沉淀法、加热、离心分离等方法)，只要利用合适的条件和步骤，即可使不同的蛋白质从提取液中分离出来。因此，目前叶蛋白的生产通常包括汁液提取、蛋白絮凝与分离和干燥这三个主要步骤，方法主要是加热法、酸碱度法、发酵法、溶剂浸提法。这些现有技术工艺复杂、能源消耗高、由于加入酸、碱或有机溶剂等，对制得的叶蛋白和环境均造成不同程度的污染。

生物是纳米技术应的重要领域，纳米科技在医学和分子生物学方面的研究较早也较多。据近期文献报道，纳米功能材料具有促进生长的生物效用，在作物栽培和水产养殖中的应用有所进展。叶蛋白是从新鲜植物叶片汁液中提取的高质量浓缩蛋白质, 含有丰富的必须氨基酸，营养价值高，具有广阔的应用前景。天然蛋白质一般在溶液中呈稳定的亲水胶体状态,故叶蛋白又称叶蛋白胶，其提取效率在很大程度上取决于叶蛋白的溶解性。纳米材料由于其独特的物理化学性质，为各个研究和生产提供了一种崭新的功能材料。大量的研究表明，纳米器件处理水之后能使水分子团变小从而增加溶质的溶解性。

发明内容

本发明的目的在于根据现有可溶性植物叶蛋白提取工艺中存在的不足，利用纳米器件，提供一种能耗低、污染小、提取工艺简单易行的可溶性植物叶蛋白的提取方法。

本发明目的通过以下技术方案予以实现：

一种可溶性植物叶蛋白的提取方法，是用纳米器件浸泡液浸泡植物叶片，再经过滤、离心，得到可溶性植物叶蛋白溶液，其中，所述纳米器件浸泡液是将纳米器件放入提取液中浸泡所得的液体。

作为一种优选方案，本发明方法中，所述提取液为Tris、醋酸钠或磷酸盐溶液。

作为一种优选方案，本发明方法中，所述纳米器件放入提取液中浸泡的时间是3~6h。

作为一种优选方案，本发明方法中，所述过滤是用纱布过滤。

作为一种优选方案，本发明方法中，所述离心是4℃，4000g转速下离心20min。

作为一种优选方案，本发明方法中，所述纳米器件是纳米高能片或强的纳米863生物助长器。

作为一种优选方案，本发明方法是：将纳米高能片或强的纳米863生物助长器放入蒸馏水中浸泡3~6h，得到纳米器件浸泡液，取植物叶片完全浸泡在浸泡液中，在4℃下静置30min，然后用匀浆机匀浆4min，纱布过滤，收集滤出液，在4℃，4000g转速下离心20min，收集上清液，即为可溶性植物叶蛋白溶液。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明可溶性植物叶蛋白的提取方法降低了提取叶蛋白过程中的能耗，减少了污染，具有节能环保，工艺流程简单易行的优选。结果表明，经纳米器件处理后的可溶性叶蛋白提取量增加了20%以上，纳米器件处理后的蛋白提取液与未处理的提取液相比较，可溶性蛋白量有显著性差异（P＜0.05）。

具体实施方式

以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。

纳米器件：

表1 本研究所用纳米器件

实施例1 纳米高能片对冷冻番茄叶茎匀浆液上清中可溶性蛋白含量的影响