[发明专利]一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法，其特征在于：

a.将铁氧体类纳/微米球形或类球形原料磁球置于盛有0.05-0.15mol/L的质子酸水溶液的容器中，超声分散5-10min，0-10℃密封静置12h，磁吸分离除去质子酸水溶液，得到质子化磁球，其中原料磁球的质量(g)与质子酸溶液的体积(mL)之比为1∶200-600；

b.往上述盛有质子化磁球的容器中加入重新蒸馏的含氨基单体和极性有机溶剂，超声分散5-10min，在0-10℃密封静置12-24h，其中原料磁球和含氨基单体的质量比为1-2∶1，原料磁球的质量(g)和极性有机溶剂的体积(mL)之比为1∶100-300；

c.将含氨基单体物质的量的1-2倍的氧化剂溶解在0.05-0.15mol/L质子酸水溶液中，质子酸水溶液的体积(mL)与原料磁球的质量(g)之比为200-400∶1，再将其缓慢滴加至b步骤所得体系，滴加时间为30-60min，超声分散5-10min，在零度到室温范围内，机械搅拌或超声辅助机械搅拌反应1-12h，得悬浮液；

d.悬浮液经磁吸分离，所得固体在室温到50℃范围内、0.08-0.1MPa真空度条件下干燥，得表面富含胺基或质子化氨基的磁性导电聚合物微球。

2.根据权利要求1所述一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法，其特征在于步骤a中所述质子酸是指盐酸、硫酸或硝酸。

3.根据权利要求1所述一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法，其特征在于步骤b中含氨基单体分子为苯胺或吡咯，或分子式I所示苯胺的衍生物，或分子式II所示吡咯的衍生物；

R₁＝H，CH₃，CH₂CH₃，OCH₃，OCH₂CH₃，Cl，Br    R₁＝H，CH₃，CH₂CH₃，OCH₃，OCH₂CH₃，Cl，Br

R₂＝H，CH₃，CH₂CH₃，OCH₃，OCH₂CH₃，Cl，Br    R₂＝H，CH₃，CH₂CH₃，OCH₃，OCH₂CH₃，Cl，Br

I                                            II

其中R₁和R₂不同时为H，Cl或Br。

4.根据权利要求1所述一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法，其特征在于步骤b中极性有机溶剂是指分析纯的甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺或乙腈。

5.根据权利要求1所述一种核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法，其特征在于当含氨基单体为苯胺或苯胺衍生物单体时，上述步骤c中的氧化剂指双氧水、氯酸钠、碘酸钾、过硫酸铵或过硫酸钾；当含氨基单体为吡咯或吡咯衍生物单体时，上述步骤c中的氧化剂指水合氯化铁、双氧水、氯酸钠、碘酸钾、过硫酸铵或过硫酸钾。

6.一种根据权利要求1所述的核-壳式磁性导电聚合物微球的制备方法制备的微球在DNA分离纯化中的应用，其特征在于：

a.将磁性导电聚合物微球用0.5-3mol/L的氨水在室温、搅拌下脱掺杂1-48h，抽滤、水洗得固体，固体经真空干燥得脱掺杂的磁性聚合物微球；

b.取脱掺杂的磁性聚合物微球，用70％(v/v)乙醇溶液消毒后，转移至一无菌离心管中，依次加入DNA粗提液和DNA结合液，摇匀，室温下放置10-60min待DNA在磁球表面吸附；磁场下收集磁球，用70％(v/v)乙醇溶液洗涤磁球，磁分离、弃上清液，将吸附DNA的磁球在室温下放置使乙醇挥发；其中脱掺杂磁性聚合物微球质量(mg)与DNA粗提液体积(uL)之比为1∶4-12；DNA结合液是pH为8的Tris-HCl缓冲液或pH为7的磷酸盐缓冲液；DNA粗提液和DNA结合液的体积之比为1∶8-25；

c.往步骤b盛有吸附DNA的磁球的无菌离心管中加入DNA解吸液，摇匀，室温下放置10-60min待DNA解吸，磁场下收集上清液，并将其转移至另一无菌离心管中；其中DNA解吸液是指2-3mol/L的NaCl溶液或pH为9-11的TE缓冲溶液，pH为9-11的TE缓冲溶液是指由10mmol/L Tris-HCl和1mmol/L EDTA溶液组成的混合溶液；DNA粗提液和DNA解吸液的体积之比为1∶5-10；

d.将步骤c中收集的上清液取样，用紫外分光光度计测定其260和280nm处的吸光值，计算DNA的浓度和纯度，并在1.0％(w/v)琼脂糖凝胶的TAE缓冲溶液中进行电泳分析；TAE缓冲溶液是指由40mmol/L Tris、20mmol/L HAc和1mmol/L EDTA组成的pH为8.0的混合溶液，琼脂糖凝胶用0.5ug/mL的溴乙啡啶溶液着色。