[发明专利]新的潜在抑癌基因CMTM7及其编码蛋白的新应用

说明书

技术领域

本发明涉及一个新的潜在抑癌基因及其编码蛋白的新应用，具体地说，本发明涉及CMTM7作为一个新的潜在抑癌基因及其编码蛋白的应用。

背景技术

CMTM(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing family)，原名CKLFSF(chemokine-like factor super family)基因家族包括9个成员，即CKLF(Chemokine-likefactor，趋化素样因子)和CMTM1-8(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containingmember 1-8)(原名CKLFSF1-8)。该家族是本发明人在国际上首次报道的一个新基因家族并申请了专利(中国专利申请号：02122266.5)。其编码产物的结构和功能特点介于经典的趋化因子(Chemokine)和四次跨膜蛋白家族(Transmembrane 4 Super Family，TM4SF)之间，在免疫、男性生殖等系统发挥重要作用，并参与肿瘤的发生和发展。

在CMTM家族成员中，人类CMTM7基因定位于第3号染色体3p22.3，有2个可变剪切体：CMTM7-v1和CMTM7-v2，其中CMTM7-v1是主要表达形式。CMTM7进化保守，在人体正常组织中广泛表达，尤其在免疫细胞中表达水平较高。目前，CMTM7的具体功能尚不清楚。

发明内容

本发明的一个目的在于研究CMTM7在肿瘤中的表达特点，研究CMTM7的新功能，提供CMTM7的新应用。

CMTM7有2个可变剪切体：CMTM7-v1和CMTM7-v2，其中CMTM7-v1是主要表达形式。在本发明中，所述CMTM7的核酸和蛋白质包括CMTM7-v1、CMTM7-v2两种形式。所述的CMTM7-v1和CMTM7-v2在GenBank的登记号分别为NM 138410和NM 181472。所述CMTM7蛋白为CMTM7基因所编码的蛋白。CMTM7定位于3p22.3，该区域在多种肿瘤中存在缺失；另外，CMTM7具有一个典型的CpG岛。

本发明研究了CMTM7在人多种正常组织以及在肿瘤组织中的表达特点，发现CMTM7在食管癌、乳腺癌、宫颈癌等部分肿瘤来源的细胞系中表达下调或缺失，在大部分表达下调或缺失的细胞系中其启动子区CpG岛存在甲基化修饰，而去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷(5-AZA-CdR)或联合曲古抑菌素A(trichostatin A)可恢复CMTM7的表达，证明其表达沉默与CpG岛的甲基化密切相关。更为重要的是，CMTM7在原发食管癌组织中也有较高频率的甲基化。

本发明的实验研究发现，在食管癌、乳腺癌、宫颈癌等来源的部分细胞系中，CMTM7表达下调或缺失，但其启动子区没有甲基化修饰，这提示除了启动子甲基化，其他因素也可能导致CMTM7表达下调或缺失。在原发食管癌组织中，分析发现在CMTM7所在染色体位点存在较高频率的杂合性缺失。

本发明还进一步进行免疫组化实验，初步结果提示CMTM7在食管癌、胃癌、肝癌和胰腺癌组织中表达下调。

本发明还通过实验证实在CMTM7表达下调或缺失的食管癌细胞系(KYSE410，KYSE180)、乳腺癌细胞系(MDA-MB-231)或宫颈癌细胞系(HeLa)中恢复CMTM7的表达，可抑制细胞增殖和细胞迁移。另外，在食管癌细胞系中恢复CMTM7的表达，可诱导细胞发生G1期阻滞。

因此，CMTM7可能是一个新的潜在抑癌基因，可能作为癌症的临床诊断和/或预后判断的辅助指标，另外CMTM7腺病毒或蛋白在治疗和/或抑制肿瘤中具有重要应用价值。

根据本发明的实验研究发现，本发明提供了CMTM7基因或其编码的蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用。具体的，所述癌症为食管癌、鼻咽癌、乳腺癌、宫颈癌、肝癌或胰腺癌。

本发明还提供了CMTM7基因或其编码的蛋白在抑制肿瘤细胞的生长和/或细胞迁移中的应用。本发明通过实验证实，CMTM7基因或其编码的蛋白能够抑制肿瘤细胞的生长和增殖，并能抑制细胞迁移。具体的，所述肿瘤细胞为食管癌细胞、乳腺癌细胞或宫颈癌细胞。在本发明的一具体实施方案中，所述细胞迁移为EGF诱导的细胞迁移。

本发明还提供了CMTM7基因或其编码的蛋白在抑制肿瘤细胞的成瘤性中的应用。