[发明专利]一种叶酸的酶联免疫检测试剂盒

权利要求书

1.一种叶酸的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于该试剂盒中试剂的组成包括：

（1）包被有叶酸包被抗原的酶标板；

（2）叶酸的多克隆抗体；

（3）酶标二抗即辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的抗体；

（4）叶酸标准品溶液；

（5）浓缩磷酸盐缓冲液；

（6）浓缩洗涤液；

（7）底物显色液A；

（8）底物显色液B；

（9）终止液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的叶酸包被抗原是将叶酸半抗原与卵清蛋白偶联得到的；所述的叶酸包被抗原的浓度为1μg/ml。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述叶酸的多克隆抗体是由叶酸与分子量范围是6.7KDa一6.8KDa的牛血清蛋白偶联制成的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔制备得到；其中所述叶酸多克隆抗体的工作浓度为1:10000～1:20000。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的酶标二抗是采用过碘酸钠将辣根过氧化物酶与羊抗兔抗体进行偶联得到的；所述酶标二抗的工作浓度为1:2000。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的叶酸标准品溶液的浓度依次为3ng/ml、6 ng/ml、12.5 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述浓缩磷酸盐缓冲液是每升含 NaCl 80g、KH₂PO₄ 2.0g、 Na₂HPO₄·12H₂O₂ 29.0g、 KCl 2.0g的水溶液。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述浓缩洗涤液是含有体积分数0.05%吐温-20的pH7.4、0.1mol/L的磷酸盐缓冲液。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的底物显色液A为TMB溶液；所述的底物显色液B为pH5.0～6.0的过氧化脲溶液，使用时显色液A与显色液B等体积混合后使用；所述的终止液为2mol/L的硫酸溶液。

9.权利要求1所述的酶联免疫试剂盒在检测食品、饲料和维生素产品中叶酸含量的应用。