[发明专利]水稻抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子标记方法无效
申请号: | 201110008274.1 | 申请日: | 2011-01-17 |
公开(公告)号: | CN102154470A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 王建飞;张红生;鲍永美;谢留杰;张晓军;黄骥;王州飞;吴云雨 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 稻瘟病 基因 pi hk1 分子 标记 方法 | ||
1.水稻黑壳子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子标记方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)取水稻样品,提取水稻样品基因组DNA;
(2)利用表1中的任意1对、2对或3对水稻黑壳子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子标记引物对所述的水稻样品基因组DNA进行PCR扩增,PCR扩增产物在8%非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳检测,如果扩增出对应大小的分子标记片段,标志着Pi-hk1(t)基因的存在,
表1
2.根据权利要求1所述的水稻黑壳子粳抗稻瘟病基因Pi-hk1(t)的分子标记方法,其特征在于所述的PCR扩增的反应体系为:10×buffer 1.0微升,4pmol/微升的InDel或SSR引物对1微升,2.5mM dNTPs 0.2微升,5单位/微升的Taq酶0.1微升,10纳克/微升的水稻样品基因组模板DNA 1微升,加水至10微升;反应程序为:DNA 94℃预变性5min后;94℃变性30sec,55℃退火30sec,72℃延伸展1min,循环35次;最后72℃延伸10min。
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