[发明专利]一种克隆鸡细胞视黄醇结合蛋白1基因编码区全序列的方法无效
申请号: | 201110008736.X | 申请日: | 2011-01-17 |
公开(公告)号: | CN102154263A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 肖礼华;朱庆;赵小玲;刘益平 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 625014 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 克隆 细胞 视黄醇 结合 蛋白 基因 编码 序列 方法 | ||
1.一种克隆鸡细胞视黄醇结合蛋白1基因编码区全序列的方法,其特征在于,包括以下步骤:A1,对鸡多个组织分别提取mRNA反转录成cDNA,然后把得到的各个组织的cDNA做成cDNA池;A2,以NCBI上原鸡的细胞视黄醇结合蛋白1基因mRNA序列为模板设计引物,扩增后进行克隆测序;A3,根据mRNA序列来判断尚未包括在扩增片段的序列及相应位置,然后以该基因DNA序列为模板,针对未能扩增到的部分序列设计引物进行扩增,扩增产物送生物工司回收纯化测序;A4,将A2和A3得到的序列进行拼接,就得到目的基因全编码区序列。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述鸡多个组织包括心、肝、肾、下丘脑、输卵管、卵巢、垂体。
3.根据权利要求1的方法,其特征在于,步骤A2中引物为SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3。
4.根据权利要求1的方法,其特征在于,步骤A3中引物为SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5。
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