[发明专利]灵芝细胞培养液及其应用

权利要求书

1.一种种子培养液，其特征在于，其组分及含量为：葡萄糖35g/L、蛋白胨5g/L、酵母粉2.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水。

2.一种氮限制发酵培养液，其特征在于，其组分及含量为：糖类20-35g/L、酵母粉0-2.5g/L、蛋白胨0-2.5g/L、谷氨酰胺0-8.76g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾0-2g/L、氯化钙0-0.05g/L、氯化钠0-0.2g/L、MgSO₄·7H₂O0.5g/L、维生素B10.5g/L，余量为水。

3.根据权利要求1所述的氮限制发酵培养液，其特征是，所述的糖类为：葡萄糖或乳糖。

4.根据权利要求1所述的氮限制发酵培养液，其特征是，所述的氮限制发酵培养液具体为以下组分中的任一一种：

1)乳糖35g/L、蛋白胨2.5g/L、酵母粉2.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

2)乳糖35g/L、蛋白胨0.5g/L、酵母粉0.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

3)乳糖35g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

4)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺8.76g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

5)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺4.38g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

6)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺1.46g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，余量为水；

7)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺2.2g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

8)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺0.73g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水；

9)葡萄糖20g/L、谷氨酰胺0.43g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，余量为水；

10)葡萄糖20g/L、磷酸二氢钾1g/L、磷酸氢二钾2g/L、氯化钙0.05g/L、氯化钠0.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，余量为水。

5.一种灵芝细胞的优化培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步、将灵芝菌丝体接入种子培养液中培养，得一级种子培养液；

第二步、取一级种子培养液，接入种子培养液中，培养，得二级种子培养液；

第三步、将二级种子细胞分别接入发酵培养液及氮限制发酵培养液中，静止培养至收获期，收取上层细胞。

6.根据权利要求5所述的灵芝细胞的优化培养方法，其特征是，所述的种子培养液的组分及含量为：葡萄糖35g/L、蛋白胨5g/L、酵母粉2.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、MgSO₄·7H₂O0.5g/L、维生素B10.05g/L，余量为水。