[发明专利]c-Met基因的siRNA片段及其运用

说明书

技术领域

本发明涉及基因治疗领域，特别涉及c-Met基因的siRNA片段及其运用。

背景技术

喉癌占全身恶性肿瘤的1%～5%，是头颈部最常见的肿瘤之一，占头颈部肿瘤的13.9％，我国部分地区发病率约为1.5～3.4/10万人，已成为严重威胁人民生命健康和生活质量的疾病，以鳞癌多见。虽然近几十年来传统的治疗方式如手术、放疗、化疗等已有很大改进，提高了患者的五年生存率，但手术治疗易使患者的喉功能严重破坏而致残；放疗仅对早期喉癌疗效好，对于大多数就诊时即为中、晚期或治疗后又出现复发、转移的患者往往效果不佳；而化疗又由于毒副作用严重常使得患者无法耐受，从而使这些治疗方式仍受到很大限制。因此，积极寻求治疗喉癌的新途径即成为耳鼻咽喉科研究者面临的新课题。

肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor，HGF)是一种多功能的细胞因子，为一种多肽，其生物学活性由 c-Met 蛋白所介导。c-Met蛋白属酪氨酸激酶活性的生长因子受体，研究发现其在促进细胞增殖分化、细胞扩散、新生血管的生成方面具有重要作用。异常表达的c-Met激活下游分子导致肿瘤的发生、发展和转移。研究表明 c-Met在喉癌中强表达，与喉癌的增殖及转移关系密切。RNA 干扰技术具有特异、有效的基因沉默效应，能够简单、高效地抑制特定基因的表达，目前已成为肿瘤基因治疗研究的热点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种siRNA片段，该片段通过RNAi方法沉默c-Met基因表达，从而达到抑制HGF-c-Met信号转导系统，发挥抑制

肿瘤功能。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

c-Met基因的siRNA片段，具有如下任一序列：

序列1：

正义链(RNAi-1F)：

5'-GATCCGTATCAGCTTCCCAACTTCACCGTCAAGAGCGGTGAA

GTTGGGAAGCTGATACTTTTTA -3’；

反义链(RNAi-1R)：

3′-GCATAGTCGAAGGGTTGAAGTGGCAGTTCTCGCCACTTCAACC

CTTCGACTATGAAAAATTCGA-5′；

序列2：

正义链(RNAi-2F)：

5′-GATCCGCAAGCCAGATTCTGCCGAACCATCAAGAGTGGTTCGGC

AGAATCTGGCTTGCTTTTTA-3′；

反义链(RNAi-2R)：

3′-GCGTTCGGTCTAAGACGGCTTGGTAGTTCTCACCAAGCCGTCTTA

GACCGAACGAAAAATTCGA -5′；

序列3：

正义链(RNAi-3F)：

5′-GATCCGGAGGGACAAGGCTGACCATATGTCAAGAGCATATGGT

CAGCCTTGTCCCTCCTTTTTA-3′；

反义链(RNAi-3R)：

3′-GCCTCCCTGTTCCGACTGGTATACAGTTCTCGTATACCAGTCGG

AACAGGGAGGAAAAATTCGA-5′。

本发明的目的之二在于提供一种siRNA 重组质粒，其根据 Genbank 中报道的c-Met基因核苷酸序列，参考 siRNA 设计原则设计并构建的重组质粒。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

c-Met基因siRNA 重组质粒，其含有如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3任一序列的c-Met基因的siRNA片段。

进一步，c-Met基因siRNA 重组质粒pSilencer2.0-c-Met-shRNA2如SEQ ID NO.10所示。

本发明的另一目的在于提供c-Met基因的siRNA片段的用途，该用途为抗肿瘤提供了一种新思路。

具体方案为：

c-Met基因的siRNA片段用于制备治疗肿瘤药物的用途。

进一步，c-Met基因的siRNA片段用于制备治疗喉癌药物的用途。

本发明的目的之四提供了c-Met基因siRNA 重组质粒的用途，该用途为抗肿瘤提供了一种新思路。

其具体方案为：

c-Met基因siRNA 重组质粒用于制备治疗肿瘤药物的用途。

进一步，c-Met基因siRNA 重组质粒用于制备治疗喉癌药物的用途。