[发明专利]一种MicroRNA特异表达谱及其应用无效

专利信息
申请号: 201110021905.3 申请日: 2011-01-18
公开(公告)号: CN102586412A 公开(公告)日: 2012-07-18
发明(设计)人: 彭志海;韩中博;樊军卫 申请(专利权)人: 上海市第一人民医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 吴桂琴
地址: 20008*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 microrna 特异 表达 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种MicroRNA特异表达谱,其特征在于,所述的MicroRNA特异表达谱为hsa-mir-19a、hsa-mir-24、hsa-mir-223、has-mir-126和has-mir-886-5p。

2.按权利要求1所述的MicroRNA特异表达谱,其特征在于,所述的MicroRNA特异表达谱通过以下步骤获得:

(1)标本准备

肝癌肝移植术后离体肝脏肿瘤石蜡包埋标本;

RNA抽提试剂trizol抽提RNA,-80℃备用;

(2)microRNA microarray分析差异表达的miRNAs

采用microRNA microarray芯片分析肝癌肝移植术后肿瘤复发离体标本和肿瘤未复发离体标本间差异表达的miRNAs;

采用Array Power标记试剂盒,用标记酶将Hy3TM或Hy5TM荧光基团标记miRNA,得到用于与芯片杂交的荧光探针;

在标准条件下使用杂交仪将标记好的探针与上述芯片杂交;

使用芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度,将实验结果转换成数字型数据保存,使用配套软件对原始数据进行分析运算;

(3)Taqman real-time PCR验证芯片结果并扩大样本量,进一步验证差异表达miRNAs。

3.按权利要求2所述的MicroRNA特异表达谱,其特征在于,步骤(2)所述的芯片分析肝癌肝移植术后肿瘤复发离体标本和肿瘤未复发离体标本间差异表达的miRNAs中,调节设立主要参数为:检测分子量范围0-50,000道尔顿,激光强度200,检测敏感度9,检测点20-80。

4.权利要求1所述的MicroRNA特异表达谱在制备肝癌肝移植术后肿瘤复发早期诊断标准中的用途。

5.权利要求1所述的MicroRNA特异表达谱在制备肝癌肝移植术后肿瘤复发预后判断标准中的用途。

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