[发明专利]沙门氏菌微量MPN检测方法

权利要求书

1.沙门氏菌微量MPN检测方法，其特征在于，通过如下步骤：(1)在12孔细菌培养板中分别加入改良的TSB，然后将待测样品接入孔中进行增菌，采用三个以上连续梯度稀释，三次重复试验；(2)在另一12孔细菌培养板中加入改良的MSRV，将步骤(1)增菌后的样品液对应接到孔中，过夜培养，根据样品的显色情况以及细菌迁移情况初步判断样品中是否含有沙门氏菌，之后利用显色培养基和生化试验进行确认；(3)将最终确认的阳性情况利用MPN软件进行统计分析，得到样品中所含沙门氏菌的数量；

改良的TSB配方：

TSB                 30g/L；

土温80              0.5g/L；

改良的MSRV配方：

MgCl₂               5-8g/L；

酸水解酪蛋白        4-10g/L；

大豆胨              2-10g/L；

蛋白胨              2-10g/L；

NaCl                5-8g/L；

KH₂PO₄              1.5g/L；

孔雀绿草酸钠        0.04g/L；

抗生素              0.01g/L；

显色剂              0.1-0.8g/L；

琼脂                3-5g/L。

2.如权利要求1所述的沙门氏菌微量MPN检测方法，其特征在于，

具体步骤如下：(1)配制改良的TSB，灭菌后分别将其加入细菌培养板的12个孔中，然后取待测样品分别加入到细菌培养板的A1、B1、C1孔中，移液枪吹打混匀，吸取其500μL分别加入到细菌培养板的A2、B2、C2孔中，移液枪吹打混匀，以此类推，各做3组平行，36℃过夜培养；(2)配制的改良MSRV，煮沸灭菌后将其加入另一细菌培养板的12个孔中，待其凝固后，将步骤(1)增菌后的样品液20μL分别对应加入到每个孔中，42℃培养24h；当颜色变为紫色且出现迁移现象，视为阳性，其他视为阴性；阳性孔挑取紫色迁移菌落，接种于沙门氏菌显色培养基，再进行TSI/LIA/尿素和A-F-O血清试验，确认阳性样品；

(4)利用MPN软件对阳性情况进行统计分析，得到样品中所含沙门氏菌数量。