[发明专利]曙红及其衍生物在蛋白质检测中的应用有效
申请号: | 201110022962.3 | 申请日: | 2011-01-18 |
公开(公告)号: | CN102590100A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 金利泰;丛维涛 | 申请(专利权)人: | 温州安得森生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/25 | 分类号: | G01N21/25;G01N1/30 |
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地址: | 325035 浙江省温州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 及其 衍生物 蛋白质 检测 中的 应用 | ||
1.曙红及其衍生物在蛋白质检测中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的曙红及其衍生物为曙红的钠盐、钾盐或铵盐。
3.一种凝胶蛋白质负染检测方法,其包括步骤:
1)将经SDS-PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于固定液中固定10~60min,弃固定液,然后用去离子水冲洗1~3次,每次1~10min;
2)在甲醇溶液里平衡5~20min,其中甲醇溶液为按体积比30~70%的甲醇水溶液;
3)加入染色液1~30min,然后放在去离子水中漂洗1~10min,其中染色液为含重量体积比0.1~2%的曙红或其衍生物及按体积比30~70%的甲醇、0.5~1.5%的乙酸水溶液。然后放在去离子水中漂洗1~10min;
4)检测。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1)中蛋白质固定时间为30min,固定液为50%乙醇/10%乙酸溶液,然后用去离子水冲洗两次,每次5min。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤2)甲醇溶液为50%甲醇水溶液,平衡时间为10min。
6.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,步骤3)染色液中曙红的浓度按重量体积比为0.5%。
7.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,步骤3)中甲醇浓度为50%,乙酸浓度为1%。
8.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,步骤3)染色液染色时间为15min。
9.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,步骤3)去离子水中漂洗时间为3min。
10.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,步骤4)检测既可以用肉眼直接观察,又可以用爱普生V700扫描仪以反向扫描模式扫描,还可以在检测波长365nm下检测。
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