[发明专利]一种与EBV感染相关的鼻咽癌诊断和治疗的分子靶标及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子靶标技术领域，涉及EBV感染相关的鼻咽癌诊断与治疗的分子靶标及其应用。

背景技术

根据国际癌症研究署对致癌因子的分类标准，EB病毒被列在第一组致癌因子中。EBV与中国南方高发的鼻咽癌(NPC)密切相关。在NPC组织中，几乎所有低分化肿瘤细胞中含有EBV基因组。EBV基因组的存在对相关肿瘤的发生发展具有重要作用。有学者认为肿瘤组织的环境如其中的病毒会引起瘤细胞miRNA的表达谱异常的改变，可以用来解释某些病毒与肿瘤高度相关的重要原因。关于EBV、miRNA与相关肿瘤的关系是否是这样，尚没有研究报道确证，由EBV直接影响的miRNA至今知之甚少。Hsa-miR203在NPC中的作用及其是否与EBV的作用相关及机制均未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与EBV感染相关的鼻咽癌诊断与治疗的分子标志物及其应用，

一种与EBV感染相关的鼻咽癌诊断和治疗的分子靶标Hsa-miR203，序列为：gugaaauguuuaggaccacuag。

所述的分子靶标Hsa-miR203应用于制备与EBV感染相关的鼻咽癌诊断的试剂。

所述的分子靶标Hsa-miR203应用于制备与EBV感染相关的鼻咽癌诊断 的试剂盒。

所述的分子靶标Hsa-miR203应用于制备与EBV感染相关的鼻咽癌治疗的试剂。

本发明的研究过程如下：(1)从293-EBV与293空白差异miRNA芯片筛选结果中选取下调明显的hsa-miR203；(2)分别提取293，293-空白，293-EBV，Lm(Lm细胞系是293-EBV细胞系通过低密度培养，EBV丢失后细胞的混合克隆)；永生化人鼻咽上皮细胞NP69细胞系，NP69-空白对照细胞系，EBV癌基因LMP1稳定转染的NP69-LMP1细胞系；鼻咽癌HONE1细胞，HONE1-空白对照细胞系，HONE1(EBV+)细胞系；鼻咽癌HNE2细胞系，HNE2-空白对照细胞系，HNE2(EBV+)细胞系；鼻咽癌；5-8F空白对照细胞系；5-8F(EBV+)细胞系；四例正常人EBV(-)淋巴细胞，四株EBV稳定感染的淋巴细胞系(LCL)，Raji(EBV+)细胞，B95-8(EBV+)的Total RNA；(3)分别提取11例正常鼻咽上皮组织与31例低分化鼻咽癌组织的Total RNA；(4)用hsa-miR203特异性逆转录试剂盒将总RNA逆转为cDNA；(5)用hsa-miR203stem-loop引物进行Real-Time PCR扩增；(6)对hsa-miR203的生物功能研究及其靶基因验证。