[发明专利]一种检测遗传性胸主动脉瘤和夹层相关基因突变的方法

权利要求书

1.一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

a.设计并制备用于TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针；

b.将待测DNA样品和步骤a所得探针加入反应管中，加入连接反应与PCR扩增反应所需试剂，DNA样本变性与探针杂交，通过调节反应温度激活连接酶，对探针进行连接反应；

c.调节反应温度激活DNA聚合酶，用一对通用引物对步骤b所得完成连接的探针序列进行PCR扩增反应；

d.将步骤c所得PCR扩增反应产物与液相芯片中的xTAG微球进行杂交，杂交反应后加入链霉素亲和素-藻红蛋白进行反应，然后通过路明克斯液相芯片设备检测荧光信号。

2.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于TGFBR1基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针包含了TGFBR1基因4个突变位点的野生型序列，所述4个突变位点为934G＞A、944A＞G、1457T＞C、1459C＞T。

3.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于TGFBR1基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针序列为SEQ ID No.1-SEQ ID No.8。

4.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于TGFBR2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针包含了TGFBR2基因2个核苷酸突变位点的野生型序列，所述的2个突变位点为1378C＞T、1379G＞A。

5.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于TGFBR2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针序列为SEQ ID No.9-SEQ ID No.12。

6.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于ACTA2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针包含了ACTA2基因7个核苷酸突变位点的野生型序列，所述的7个突变位点为397A＞C、353G＞A、450T＞C、445C＞T、664T＞C、772C＞T、773G＞A。

7.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，用于ACTA2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针序列为SEQ ID No.13-SEQ ID No.26。

8.按照权利要求1所述，一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，多重寡核苷酸连接检测探针包含一条长探针和一条短探针，其中长探针包含5’端与靶基因特异性序列互补的杂交序列，3’端共同序列和位于杂交序列和共同序列之间的特异性标签序列，短序列包含3’端与靶基因特异性序列互补的杂交序列和5’端共同序列。