[发明专利]用于培养烟草花药的培养基配方无效
申请号: | 201110023475.9 | 申请日: | 2011-01-21 |
公开(公告)号: | CN102144552A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 刘仁祥;代飞;黄莺;徐铭;聂琼;朱俊;徐如宏;韩孝六 | 申请(专利权)人: | 贵州大学;贵州省烟草公司安顺市公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 程新敏 |
地址: | 550003 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 培养 烟草 花药 培养基 配方 | ||
技术领域
本发明涉及植物组织培养的培养基,特别是涉及一种用于培养烟草花药的培养基配方。
背景技术
单倍体植株是进行遗传研究和单倍体育种的重要材料,目前,花药培养是产生单倍体植株的最有效方法。活性炭在花药培养中具有普遍提高出苗率的作用(卜学贤[1998]活性碳对培养基中生长调节物质的吸附作用;刘用生[1994]植物组织培养中活性碳的使用;王敬驹[1983]提高甘蔗组织培养效率的研究;朱至清[1988]花药和花药培养.经济植物组织培养;贾兴华[1991]烟草花培育种;曹孜义[1996]实用植物组织培养技术教程;Anagnostakis SL[1974]Haploid plants from anthers of tobacco enhancement with charcoal;Johansson L[1982]Improrement of anther culture technique;Fridborg G[1975] Effects of activated charcoal on growth and morphogenesis in cell culture Physiol Plant;Smith RH[1983]In vitro propagation of Nadina domestica.Hortscience等),但是,活性炭有使培养基不凝固、畸形苗率增加、研究复杂化等副作用(卜学贤[1998]活性碳对培养基中生长调节物质的吸附作用;刘用生[1994]植物组织培养中活性碳的使用;贾兴华[1991]烟草花培育种);特别是畸形苗率增加,导致正常可用苗数减少(贾兴华[1991]烟草花培育种),有时甚至少于不加活性炭的处理,对于以获得单倍体植株为目的的研究是非常不利的。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种用于培养烟草花药的培养基配方,它既提高烟草花药培养出苗率,又能减少畸形苗率,增加单倍体植株数量,以替代活性炭在植物组织培养中的作用。
本发明是这样实现的:用于培养烟草花药的培养基配方,按重量份数计算,它包括蔗糖28000~32000份、琼脂6000~8000份、NH4NO3680~760份、KNO3880~920份、CaCl2·2H2O130~190份、MgSO4·7H2O150~210份、NaH2PO460~80份、Na2-EDTA50~70份、FeSO4·7H2O40~50份、MnSO4·4H2O20~30份、ZnSO4·7H2O15~25份、H3BO415~25份、盐酸硫胺素0.3~0.7份、烟酸0.3~0.7份、盐酸吡哆醇0.3~0.7份、肌醇90~110份及甘氨酸1~3份;pH值为5.5~6.0。
更优选的方案是,按重量份数计算,它包括蔗糖30000份、琼脂7000份、NH4NO3720份、KNO3900份、CaCl2·2H2O160份、MgSO4·7H2O180份、NaH2PO468份、Na2-EDTA60份、FeSO4·7H2O45份、MnSO4·4H2O25份、ZnSO4·7H2O20份、H3BO420份、盐酸硫胺素0.5份、烟酸0.5份、盐酸吡哆醇0.5份、肌醇100份及甘氨酸2份;pH值为5.8。
为了验证本发明的效果,采用本发明的配方与活性炭分别进行试验,具体如下:
基本培养基采用Nitsch H(1967)配方,蔗糖30g/l,琼脂0.8%,PH=5.8。
(2.1)活性炭作用实验
采用烟基一号、H和H的变形加或不加活性炭共11种处理(表1)。
(2.2)不同活性炭试剂级别对出苗率的影响试验
设H基本培养基附加分析纯活性炭和化学纯活性炭2个处理。
(2.3)活性炭、水洗活性炭、活性炭浸提液对出苗率、畸形苗率的影响实验
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