[发明专利]3-甾酮-△1-脱氢酶和工程菌及应用有效
申请号: | 201110024534.4 | 申请日: | 2011-01-21 |
公开(公告)号: | CN102168099A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
发明(设计)人: | 魏东芝;王风清;陈苗苗;林良才 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/63;C12N1/19;C12P33/02;C12R1/84 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 薛琦;钟华 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甾酮 脱氢酶 工程 应用 | ||
1.一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶的基因,是下列核苷酸序列之一:
1)其为序列表中SEQ ID NO:1所示的碱基序列;
2)编码由序列表中SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或其无义突变序列组成的蛋白质。
2.一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶,其是序列表中SEQ ID NO:2所示氨基酸序列或其无义突变序列组成的蛋白质。
3.包括权利要求1所述的3-甾酮-Δ1-脱氢酶基因的核苷酸序列的表达载体。
4.一种高效表达3-甾酮-1-脱氢酶的基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株表达3-甾酮-Δ1-脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示或为其无义突变序列。
5.如权利要求4所述的基因工程菌株,其特征在于,编码所述3-甾酮-Δ1-脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
6.如权利要求4所述的基因工程菌株,其特征在于,编码所述3-甾酮-Δ1-脱氢酶的基因位于重组质粒上或整合在染色体上。
7.如权利要求4所述的基因工程菌株,其是将权利要求3所述的表达载体转化到宿主微生物中得到的基因工程菌株。
8.如权利要求7所述的基因工程菌株,其特征在于,该宿主微生物为毕赤酵母KM71或GS115,得到的基因工程菌株为毕赤酵母KM71-ksdD1或GS115-ksdD1。
9.如权利要求4或5所述的3-甾酮-Δ1-脱氢酶基因工程菌株在用于转化3-酮基甾体化合物中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于所述的转化3-酮基甾体化合物是将雄甾-4-烯-3,17-二酮转化为雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮或宝丹酮。
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