[发明专利]一株高效固氮的大豆慢生根瘤菌及其培养方法与它的用途有效
申请号: | 201110024851.6 | 申请日: | 2011-01-24 |
公开(公告)号: | CN102174436A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 杜迎辉;苏海榆;高玉爽;王琰;李春艳;杜月芳;徐志文 | 申请(专利权)人: | 领先生物农业股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/02;A01P21/00;C12R1/01 |
代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人: | 向华 |
地址: | 066004 河北省秦*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效 固氮 大豆 生根 及其 培养 方法 用途 | ||
1.一株高效固氮的大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)CGMCC No.4346。
2.根据权利要求1所述大豆慢生根瘤菌CGMCC No.4346的培养方法,其特征在于该方法的步骤如下:
(1)菌种的活化:接种大豆慢生根瘤菌CGMCC No.4346至斜面培养基,在温度28℃下培养120小时;
所述的斜面培养基组成如下:甘露醇10g/L、酵母膏1.0g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化钠0.2g/L、琼脂18g/L,pH6.8~7.0;
(2)种子培养:将活化菌种转接至灭菌液体培养基中,在温度28℃与160~180rpm条件下摇床培养72小时;
所述的种子培养基组成如下:甘露醇10g/L、酵母膏1.0g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化钠0.2g/L,pH6.8~7.0;
(3)发酵培养:以体积计按照5~15%接种量将步骤2)得到的种子液转接入发酵培养基中,在温度28℃与150rpm的条件下培养72小时,得到所述液体大豆慢生根瘤菌剂;
所述的发酵培养基组成如下:①山梨醇8~12g/L、酵母膏1.0~5.0g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化钠0.2g/L,pH6.8~7.0,或
②二甘醇8~12g/L、酵母膏1.0~5.0g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化钠0.2g/L,pH6.8~7.0。
3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于所得到的液体大豆慢生根瘤菌CGMCC No.4346菌剂活菌数均达到45亿/ml以上。
4.根据权利要求2所述方法得到的大豆慢生根瘤菌剂在大豆种植中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于在种植大豆时,按照每亩地为根据权利要求2所述方法制备的液体大豆慢生根瘤菌剂10~20ml与大豆种子混拌均匀,阴干后播种。
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