[发明专利]谷胱甘肽浓度的定量测定

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速测定还原型谷胱甘肽(GSH)的方法，主要应用于食品检验及经济作物改良测定等技术领域。

背景技术

谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物(L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸)，分子式为C₁₀H₁₇O₆SN₃。它于1921年被发现，1930年确定化学结构。美国著名营养保健专家艾尔·敏德尔博士称谷胱甘肽为三倍效能的抗衰老氨基酸。

谷胱甘肽的主要生理功能是抗自由基，抗衰老，抗氧化。机体代谢产生的过多自由基会损伤生物膜，侵袭生命大分子，促进机体衰老，并诱发肿瘤或动脉硬化的产生。谷胱甘肽可消除自由基，能起到强有力的保护作用。谷胱甘肽不仅能消除人体自由基，还可以提高人体免疫力。它不但能增进血球，制造保护物质的功能(保护物质指能保护身体免受感染的物质)，同时，也能降低体内发炎物质的总含量，这些发炎物质是由细胞制出来的。谷胱甘肽在老人迟缓化的细胞上所发挥的功效比年轻人大。为此，对于衰老的免疫系统，谷胱甘肽将维持之，并使之臻于健康。

谷胱甘肽对于放射线、放射性药物所引起的白细胞减少等症状，有强有力的保护作用。谷胱甘肽能与进入人体的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合，并促进其排出体外，起到中和解毒作用。

谷胱甘肽可阻止氧化血红蛋白，保护巯基酶分子中-SH基，有利于酶活性的发挥，并且能恢复已被破坏的酶分子中-SH基的活性功能，使酶重新恢复活性。谷胱甘肽还可以抑制乙醇侵害肝脏所产生的脂肪肝。

谷胱甘肽在人体内的生化防御体系起重要作用，具有多方面的生理功能。谷胱甘肽可作为治疗白内障药剂的主要成分。近年来，西方科学家，尤其是日本学者发现谷胱甘肽也具有抑制艾滋病毒的功能。谷胱甘肽是孕妇的必需营养补充剂，它关系到婴儿的体内发育生长。研究表明，有些孕妇身体虚弱缺乏蛋白质，主要是缺乏谷胱甘肽。

食品中添加谷胱甘肽可起到意想不到的作用。

1、加入到面制品中，可起到还原作用。不仅使制造面包的时间缩短至原来的二分之一或三分之一，劳动条件大幅度改善，并起到食品营养的强化作用及其他功能。

2、将其加入到酸奶和婴幼儿食品中，相当于维生素C，可起到稳定剂的作用。

3、将其拌到鱼糕中，可防止色泽加深。

4、加到肉制品和干酪等食品中，具有强化风味的效果。

谷胱甘肽(Glutathione，GSH)还是广泛分布于植物和微生物细胞内最主要、含量最丰富的含巯基的低分子肽。GSH作为植物体内主要的还原态硫之一，在植物体抵抗各种胁迫(冷害、干旱、重金属、真菌等)的过程中起着重要的作用，其含量水平的高低与植物对各种环境胁迫的忍耐程度密切相关。

因此，在食品、经济作物改良、药品检验等各个领域对谷胱甘肽的检测成为很常用的应用方法。

发明内容

目前常利用谷胱甘肽和5，5’-2-巯基-2-硝基苯酸(DTNB)的氧化还原反应测定谷胱甘肽含量，但由于5，5’-2-巯基2-硝基苯酸可与许多含活性巯基基团物质反应，因此会受到有机物样品中其它含活性巯基基团物质的干扰。申清人在长期对含硒化合物的研究中意外的发现化合物I能与各种物质的巯基发生反应，却唯独不与谷胱甘肽的巯基产生反应，因此可以利用化合物I的特异性反应，改进5，5’-2-巯基-2-硝基苯酸测定谷胱甘肽的方法。其中化合物I的结构式如下：

本发明的目的是提供定量测定样品中谷胱甘肽含量的方法，该方法先在样品中加入化合物I，然后使用含有5，5’-2-巯基-2-硝基苯酸(DTNB)的溶液与样品反应，最后测量样品的吸光光度值，从而测算样品中谷胱甘肽的含量。其中含有5，5’-2-巯基-2-硝基苯酸(DTNB)的溶液可以是传统的检测方法中所使用的溶液，因此其中还可以含有NADPH，K₂HPO₄，EDTA等。

利用本发明的方法，测量样品中谷胱甘肽的含量更加准确可靠。

具体实施方式：

实施例1：制备化合物I

化合物I的制备：将5克硒氯苯甲酰氯溶于二氯甲烷50ml中，在将该二氯甲烷溶液缓慢滴加入溶有3克乙醇胺溶的二氯甲烷溶液，滴加完全后室温反应2小时，抽滤，干燥，然后将所得产品6克与4克乙苯在密闭容器中混合，加热后550-650℃，施加0.04-0.06Mpa的绝对压力，加入氧化铁催化，反应3小时，即可得到8克化合物I。

实施例2：测定样品中的谷胱甘肽含量