[发明专利]一种高产率的微藻培养方法

权利要求书

1.一种微藻培养方法，其特征在于，该方法包括微藻藻种的异养培养步骤和以异养培养所获得的藻细胞作为种子实施的光自养培养步骤。

2.一种油脂生产方法，其特征在于，所述方法包括微藻藻种的异养培养步骤、以异养培养所获得的藻细胞作为种子实施的光自养培养步骤、以及藻细胞采收和油脂提取的步骤。

3.一种蛋白质生产方法，其特征在于，所述方法包括微藻藻种的异养培养步骤、以异养培养所获得的藻细胞作为种子实施的光自养培养步骤、以及藻细胞采收和蛋白质提取的步骤。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，采用分批培养、补料分批培养、半连续培养和连续培养等模式实施所述微藻藻种的异养培养。

5.如权利要求1-4中任一项所述方法，其特征在于，所述的微藻选自：

绿藻门小球藻属中的蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)普通小球藻(Chlorella vulgaris)，椭圆小球藻(Chlorella ellipsoidea)，Chlorella emersonii，Chlorella sorokiniana，Chlorella saccharophila，Chlorella regularis，Chlorellaminutissima，Chlorella protothecoides，Chlorella zofingiensis，以及绿藻门中的Brachiomonas submarina，Chlamydobonas reinhardtii，Chlamydomonasacidophila，Haematococcus pluvialis，Haematococcus lacustris，Scenedesmusobliquus，Spongiococcum exetriccium，Tetraselmis suecica，Tetraselmis chuii，Tetraselmis tetrathele，Tetraselmis verrucosa，Micractinium pusillum；

硅藻门的Cylindrotheca fusiformis，Nitzschia laevis，Nitzschia alba，Nitzschiafonticola，Navicula incerta，Navicula pelliculosa；

蓝藻门的Anabaena variabilis；

金藻门的Poterioochromonas malhamensis；

甲藻门的Amphidinium carterae，Crypthecodinium cohnii；

裸藻门的Euglena gricilis；和

红藻门的Galdieria sulphuraria。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述微藻藻种异养培养的步骤包括：在生物反应器中加入pH为4.0～9.0的培养基，按工作体积的0.1～30％接入微藻藻种进行分批培养、补料分批培养、半连续培养或连续培养，培养温度为10～40℃，控制pH小于9.0，控制溶氧在1％以上。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，以异养培养所获得的藻细胞作为种子进行光自养培养，包括：将异养培养的藻种接到光自养培养装置中进行光自养培养，培养温度为5～50℃，连续光照或间歇光照，光照强度为0.1～150klx，光自养培养周期为5～500小时，初始接种密度为0.01～10.00克/升，pH为4.0～12.0。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，藻种的异养培养基由氮源、有机碳源、无机盐、微量元素和水组成；光自养培养基由氮源、无机盐和水组成。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述藻种异养培养步骤在摇瓶、机械搅拌式、气升式或鼓泡式生物反应器中进行，所述光自养培养步骤在摇瓶或选自敞开式的跑道池或圆池、封闭式的平板式光生物反应器或管道式光生物反应器或柱式光生物反应器、薄膜立袋或吊袋等用于微藻光自养培养的装置中进行，光照条件为自然光或人工光。

10.如权利要求1～9中任一项所述的方法，其特征在于，当异养培养液中的有机碳源消耗完后，结束异养培养，并将异养培养所得藻细胞作为种子实施光自养培养步骤。