[发明专利]一种专用启动子及培育抗病转基因植物的方法

权利要求书

1.DNA分子，为如下(1)或(2)或(3)所述的DNA分子：

(1)序列表中序列2所示的DNA分子；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA杂交且具有启动子功能的DNA分子；

(3)与(1)限定的DNA至少具有90％以上同源性且具有启动子功能的DNA分子。

2.含有所述启动子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

3.如权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为如下(I)或(II)或(III)：

(I)将pAHC20质粒的Sph I和Bgl II酶切位点之间的小片段替换为序列1所示DNA分子得到的重组质粒；

(II)将pAHC20质粒的Sph I和Bgl II酶切位点之间的小片段替换为序列表的序列1所示DNA分子，BamH I和Sac I酶切位点之间的小片段替换为TiERF1蛋白的编码基因得到的重组质粒；

(III)用限制性内切酶Bgl II与BamH I双酶切pAHC20载体，回收小片段；用限制性切酶BamHI酶切重组质粒甲，回收载体骨架；将所述载体骨架和所述小片段连接得到的重组质粒；所述重组质粒甲为将序列表的序列1所示的DNA分子插入到pAHC20载体质粒的HindIII和BamHI位点之间得到的重组质粒；

所述TiERF1蛋白为如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列4的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗性相关的由序列4衍生的蛋白质。

4.如权利要求3的(II)所述的重组质粒，其特征在于：所述TiERF1蛋白的编码基因是如下1)至3)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列3所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码植物抗性相关蛋白的DNA分子；

3)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码植物抗性相关蛋白的DNA分子。

5.一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将启动子和由所述启动子驱动的TiERF1蛋白的编码基因导入出发植物中，得到抗病性强于所述出发植物的转基因植物；所述启动子为序列表的序列2所示的DNA；

所述TiERF1蛋白为如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列4的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗性相关的由序列4衍生的蛋白质。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述TiERF1蛋白的编码基因是如下1)至3)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列3所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码植物抗性相关蛋白的DNA分子；

3)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码植物抗性相关蛋白的DNA分子。

7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述启动子和所述TiERF1蛋白的编码基因通过重组质粒pA20-Ubi::TiERF1导入所述出发植物；

所述重组质粒pA20-EnRSS1P::TiERF1是在pAHC20质粒的多克隆位点插入所述启动子和所述TiERF1蛋白的编码基因得到的重组质粒；

所述重组质粒pA20-EnRSS1P::TiERF1优选为将pAHC20质粒的SphI和Bgl II酶切位点之间的小片段替换为序列表的序列1所示DNA分子，BamHI和Sac I酶切位点之间的小片段替换为所述TiERF1蛋白的编码基因得到的重组质粒。

8.如权利要求5至7中任一所述的方法，其特征在于：所述出发植物为单子叶植物或双子叶植物；所述单子叶植物优选为小麦。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述抗病为抗小麦纹枯病；所述小麦纹枯病具体为由禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)引起的小麦纹枯病。

10.如权利要求5至8中任一所述的方法，其特征在于：所述抗病为抗禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)引起的病害。