[发明专利]霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物新工艺无效
申请号: | 201110031709.4 | 申请日: | 2011-01-30 |
公开(公告)号: | CN102174630A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 刘彩田;赵有杰 | 申请(专利权)人: | 天津太平洋化学制药有限公司 |
主分类号: | C12P33/20 | 分类号: | C12P33/20;C12R1/845 |
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地址: | 300350 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉菌 发酵 生物 合成 制备 氧化物 新工艺 | ||
1.一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:它是以碳源、氮源和消沫剂为主要原料,碳源:葡萄糖60~85kg;氮源:玉米浆60~85kg;蚕蛹粉10~20kg;硫酸铵5~10kg;消沫剂:聚醚1000~2000ml;搅拌反应,并在生物发酵过程中通入空气,经氧化反应、压滤脱水、吹干,将底物沃氏氧化物转化为含有霉菌氧化物的菌丝体,再经丙酮提取得到霉菌氧化物粗品,经甲苯、氯仿混合溶媒精制得到霉菌氧化物精品。
2.一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:它包括以下步骤:
(1)菌丝制备:
A、将碳源:葡萄糖60~85kg;氮源:玉米浆60~85kg;蚕蛹粉10~20kg;硫酸铵5~10kg;消沫剂:聚醚1000~2000ml一次投入到一级发酵罐内,加入1-4吨水,调整PH值至2-5,蒸汽灭菌,降温至26±4℃时,接入黑根霉的孢子悬浮液3-50升,孢子悬浮液浓度为10-300万/ml,通入空气,搅拌12-36h,后移入二级发酵罐;
B、按与一级发酵罐同样的物料配比投5-10倍物料,经灭菌,降温至26±4℃,移入A步骤所制全部液体,通入空气、搅拌18-36h,投入340kg底物沃氏氧化物,于25~30℃进行生物氧化,取样镜检,及色谱测试,底物转化比例达到50-60%后,提高温度至30-60℃,下口罐放料;
C、将菌丝液体压入板框压混机,滤掉发酵液,将菌丝体空气吹干,再将菌丝体粉碎;
(2)霉菌氧化物粗品的制备:将粉碎后的菌丝体投入提取罐内,加入菌丝体重量5~10倍丙酮,提取2-8次,将提取液浓缩结晶,得霉菌氧化物粗品;
(3)霉菌氧化物精制:将霉菌氧化物粗品投入精制罐内,加入霉菌氧化物粗品重量10~15倍体积的甲苯、氯仿混合溶媒,全溶浓缩,反复精制3-9次,取样测试,霉菌氧化物含量大于97%后,下口罐放料、滤干,精品入烤箱干燥,取样送检,霉菌氧化物含量大于97%为霉菌氧化物。
3.如权利要求2所述的一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:所说的搅拌温度为26±4℃。
4.如权利要求2所述的一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:所说的通入空气为空气和反应液的体积比为0.21-0.28倍体积/min。
5.如权利要求2所述的一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:所说的氧化反应时间为24-72小时。
6.如权利要求2所述的一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺,其特征在于:所说的甲苯、氯仿体积比为:1∶2~2∶1。
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